常用固定液的種類及(色譜分析固定液有哪些分類)

1.色譜分析固定液有哪些分類

一、烴類： 是非極性固定液，包括烷烴和芳烴。

常用的有角鯊烷（相對極性定為零）、石蠟烷和聚乙烯等。 二、硅氧烷類： 是通用型固定液，從弱極性到極性都有，種類多，使用溫度較高，溶解能力強，使用范圍廣。

1、聚二甲基硅氧烷類： 目前使用最廣泛的固定液，可使用溫度范圍大，對一般的有機化合物有較好的溶解能力。 常用的固定液有：SE-30、OV-1、OV-101、SP2100、SF-96、DC-200和UCW982等。

2、聚苯基甲基硅氧烷類： 由于硅原子上引入了苯基，與甲基硅酮相比較，芳香化合物的溶解度升高，極性組分保留值增大。

2.氣液色譜常用的固定液有哪幾類

氣相色譜柱常用的固定液 各類很多，常用的有

一、非極性

1、100%Dimethyl polysiloxane,100%聚二甲基硅氧烷，商品名：AC1,OV-101,OV-1,DB-1,SE-30,HP-1,RTX-1,BP-1

二、弱極性

2、5%Phenyl dimethyl polysiloxane, 5%二苯基（95%）二甲基聚硅氧烷，商品名：AC5,SE-52,

3、5% Phenyl 1%vinyl dimethyl polysiloxane,5%二苯基1%乙烯基（94%）二甲基聚硅氧烷，商品名：OV-5,DB-5,SE-54,HP-5,RTX-5,BP-5

注：2、3常無嚴格區(qū)分，通常混稱。

三、中等極性

4、50%Phenyl dimethyl polysiloxane, 50%二苯基（50%）二甲基聚硅氧烷，商品名：OV-17,HP-50,RTX-50

5、14%Cyanopropyl phenyl polysiloxane, 14%氰丙基苯基（其中7%氰丙基7%苯基）（86%）二甲基聚硅氧烷，商品名：AC10,OV-1701,DB-1701,RTX-1701

6、50% Cyanopropyl phenyl polysiloxane,50%氰丙基苯基（其中25%氰丙基25%苯基）（50%）二甲基聚硅氧烷，商品名：AC225,OV-225,BP-225,DB-225,HP-225,RTX-225

四、強極性

7、polyethylene glycol，聚乙二醇，商品名：AC20,PEG20M,HP-INNOWAX(FFAP是其與2-硝基對苯二甲酸的反應(yīng)產(chǎn)物)

常用毛細管色譜柱對應(yīng)表

SE-30、OV-1，化學組成：100%甲基聚硅氧烷（膠體），所屬極性：非極性，適用范圍：碳氫化合物、農(nóng)藥、酚、胺，對照牌號：DB-1、BP-1、007-1、SPB-1 、RSL-150、CPSRL-5 、HP-1.

OV-101，化學組成：100%甲基聚硅氧烷（流體），所屬極性：非極性 ，適用范圍：氨基酸、碳氫化合物、藥物胺 ，對照牌號：HP-100、SP-2100

SE-52、SE-54，化學組成：5%苯基聚硅氧烷、1%乙烯基 5%苯基甲基聚硅氧烷 ，所屬極性：弱極性 ，適用范圍：多核芳烴、酚、酯、碳氫化合物、藥物胺，對照牌號：DB-5 、BP-5、SPB-5、007-2 、OV-73、CPSIL-8、RSL-120 、HP-5.

OV-1701，化學組成：7%氰丙基、7%苯基甲基聚硅氧烷，所屬極性：中極性，適用范圍：藥物、醇、酯、硝基苯類、除莠劑，對照牌號：BP-10、RSL-1701、DB-1701、HP-1701、CPISL-19.

OV-17，化學組成：50%苯基 50%甲基聚硅氧烷，所屬極性：中極性，適用范圍：藥物、農(nóng)藥，對照牌號：DB-17、HP-17、007-17、SP-2250、RSL-300.

OV35，化學組成：35%苯基 65%二甲基聚硅氧烷，所屬極性：中極性.

OV-225，化學組成：25%氰丙基、25%苯基、甲基聚硅氧烷，所屬極性：中極性，適用范圍：脂肪酸甲脂、碳水化合物、中行固醇，對照牌號：DB-225、HP-225、BP-225、CPSIL-43、RSL-500.

OV-275，化學組成：100%氰丙基聚硅氧烷，所屬極性：強極性.

XE-60，化學組成：25%氰乙基、75%二甲基聚硅氧烷，所屬極性：中極性，適用范圍：酯、硝基化合物，對照牌號：DB-225、HP-225、CPSIL-43、RSL-500.

FFAP，化學組成：聚乙二醇硝基苯改性，所屬極性：極性，適用范圍：酸、醇、醛、酯、酮、腈，對照牌號：SP-1000、OV-351、BP-21、HP-FFAP.

PEG-20M，化學組成：聚乙二醇-20M，所屬極性：極性，適用范圍：酸、醇、醛、酯、甘醇，對照牌號：HP-20M、DB-WAX、007-20M、BP-20.

3.最常用到的幾種組織固定液

(1)中性緩沖甲醛。該液能夠固定大多數(shù)組織結(jié)構(gòu)，對脂類有較好的固定效果。免疫組化、原位雜交等試驗都可以使用。本液還可以長時間存放，是實驗室常備的固定液之一。固定液浸透較慢，固定時間不限，浸透之后可以長時間存放（免疫組化和原位雜交標本建議不要這么做）。美中不足是染色時酸性染料著色不佳，并且本液對糖類沒有固定作用。

(2)AAF。該液由醋酸（A）、酒精（A）和甲醛（F）為主要成分，廣泛用于動植物組織的固定和各種實驗檢測，植物固定則是首選。固定液滲透均一，速度很快。固定時間一般為4 ~ 24 h。此液處理后，染色結(jié)果細膩，但酸性染料著色力下降。本液配制后可以短時間放置。

(3)Bouin。過去常用的一種固定液，主要用于軟化皮膚或者富含結(jié)締組織的標本，在胚胎標本處理中使用很廣。用本液處理后，酸性染料著色鮮艷。但是，由于含有苦味酸，不能用于原位雜交等實驗檢測。此外，本液對很多細胞器的破壞較大，尤其不適于固定腎臟標本。經(jīng)本液固定的標本，尺寸應(yīng)盡可能小，否則內(nèi)外固定的效果有所差別。本液可以較長時間存放，但標本在其中不應(yīng)久存，固定8 ~ 24 h為宜。

(4)Zamboni。用于免疫組化和免疫電鏡的首選固定液。保存細微結(jié)構(gòu)和抗原特性最好的固定液之一。固定液浸透速度較慢，要求標本不能過大，常用于血管灌注。該液可以長時間存放，標本在其中也可以保存較長時間，抗原封閉作用相對較弱。由于含有苦味酸，故不用于原位雜交試驗。

(5)Helly,Susa,Zenker。這是三種比較相近的固定液，含有汞鹽和重鉻酸鉀。經(jīng)這類固定液處理，標本對酸性和堿性染料均有較好的親和能力。染色處理前需要脫汞和脫碘操作。目前除了幾種傳統(tǒng)染色更鮮艷外，并無其他優(yōu)勢。

4.免疫組化實驗中固定液的選擇遵循哪些原則

免疫組化實驗中固定液的選擇是免疫組化成功與否的基礎(chǔ)。

用于免疫組化實驗的固定液種類較多，性能各不一樣。不同抗原，其穩(wěn)定性各不相同，對固定液的耐受性 差異較大。

所以，除要了解不同固定劑的特性外，不同的抗原和標本需經(jīng)過反復試驗，必要時可作多種固定液對比，從而選出理想的固定液。選擇最佳固定液的標準 是：①最好地保持細胞和組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)；②最大限度地保存抗原的免疫活性。

中性緩沖多聚甲醛（或福爾馬林）液是適應(yīng)性較為廣泛的固定液。值得注意的是免疫 組化實驗中禁用含重金屬的固定液。

5.實驗室常用固液分離的方法及注意事項

最常用的就是過濾，也會用到沉淀后吸取上清夜的方法。

過濾常用的工具有漏斗，在漏斗中放入過濾材料，然后把需要分離的固液混合物倒入漏斗即可。

過濾材料有濾紙、棉花、紗布等，濾紙又分為快速、中速、慢速濾紙。

選用哪種材料過濾取決于實驗對濾夜的澄清度、雜質(zhì)度的要求.必要時，可以多次過濾。

從廢水中除去固體一般采用篩或沉淀方法。污泥處理中采用的分離方法有污泥重力濃縮、污泥的浮選或污泥的機械脫水。水處理中有微濾、澄清和深床過濾等方法。

把固體和液體分開的過程都是固液分離，方法非常多，沉降，過濾，膜過濾，壓濾，真空，離心機。

固液分離機是利用離心力，分離液體中固體顆粒物和絮狀物的機械。

6.固定液的選擇原則

根據(jù)被分離組分和固定液分子間的相互作用關(guān)系，固定液的選擇一般根據(jù)所謂的“相似性原則”，即固定液的性質(zhì)與被分 離組分之間的某些相似性，如官能團、化學鍵、極性、某些化學性質(zhì)等，性質(zhì)相似時，兩種分子間的作用力就強，被分離組分在固定液中的溶解度就大，分配系數(shù) 大，因而保留時間就長；反之溶解度小，分配系數(shù)小，因而能很快流出色譜柱。

下面就不同情況進行討論：

a、分離極性化合物，采用極性固定液。這時樣品各組分與固定液分子間作用力主要是定向力和誘導力，各組分出峰次序按極性順序，極性小的先出峰，極性越大， 出峰越慢；

b、分離非極性化合物，應(yīng)用非極性固定液，樣品各組分與固定液分子間作用力是色散力，沒有特殊選擇性，這時各組分按沸點順序出峰，沸點低的先出峰。對于沸 點相近的異構(gòu)物的分離，效率很低；

c、分離非極性和極性化合物的混合物時，可用極性固定液，這時非極性組分先餾出，固定液極性越強，非極性組分越易流出；

d、對于能形成氫鍵的樣品。如醇、酚、胺和水的分離，一般選擇極性或氫鍵型的固定液，這時依組分和固定液分子間形成氫鍵能力大小進行分離。“相似相容性原 則”是選擇固定液的一般原則，有時利用現(xiàn)有的固定液不能達到滿意的分離結(jié)果時，往往采用“混合固定液”，應(yīng)用兩種或兩種以上性質(zhì)各不相同的，按適合比例混 合的固定液，使分離有比較滿意的選擇性，又不致使分析時間延長。然而，在實際工作中選擇固定液往往是參考資料或文獻介紹的實例來選用固定液的。