1、傳代培養保藏法:包括又有斜面培養、穿刺培養、皰肉培養基培養等,培養后于4-6℃冰箱內保存。
2、液體石蠟覆蓋保藏法:液體石蠟覆蓋保藏法是傳代培養的變相方法,能夠適當延長(cháng)保藏時(shí)間。
3、載體保藏法:載體保藏法是將微生物吸附在適當的載體,如土壤、沙子、硅膠、濾紙上,而后進(jìn)行干燥的保藏法。
4、寄主保藏法:寄主保藏法用于目前尚不能在人工培養基上生長(cháng)的微生物。
5、冷凍干燥保藏法:先使微生物在極低溫度(-70℃左右)下快速冷凍,然后在減壓下利用升華現象除去水分(真空干燥),其中真空冷凍干燥法最常見(jiàn)。
擴展資料
菌種保藏的原理:
菌種保藏有多種方法,其原理大多大同小異,主要是運用一些方式盡量降低生物體內的代謝,達到延長(cháng)生命,減少變異的目的。通常采用的方法為低溫、缺氧、干燥。
低溫主要對菌種產(chǎn)生兩方面的影響,首先,較低的溫度可以減緩機體細胞的酶活,降低新陳代謝,達到保藏菌種的目的。其次,低溫同時(shí)會(huì )導致菌體誘發(fā)菌絲自溶機制,如果降溫過(guò)程失誤,同樣會(huì )造成機體的機械損傷和溶質(zhì)損傷。
參考資料來(lái)源:百度百科——菌種保藏
直接用微生物菌體保鮮 目前人們也有直接用微生物菌體對食品的保鮮防腐進(jìn)行研究。例如劉紹軍等人[9]用啤酒酵母菌對草莓進(jìn)行了保鮮研究。結果啤酒酵母菌對草莓的后熟起到推遲作用而減輕草莓腐爛程度。歐體庫爾?瑪合木提等人[10]從葡萄表面分離到一株鏈霉菌H2用于新疆甜瓜的防腐保鮮。在綠茶中摻入嫌氣性蠟樣芽孢桿菌經(jīng)低溫處理對茶葉的保鮮,該技術(shù)已獲得了中國發(fā)明專(zhuān)利(專(zhuān)利號CN1145177A)。國外對一種有益真菌Trichodermaharzanium進(jìn)行了新西蘭獼猴桃的防霉研究。結果表明,用此方法保護的6000只新西蘭獼猴桃不受霉菌侵染達1a之久。而沒(méi)被處理的獼猴桃有一半被Botrytiscinerea霉菌破壞
多糖類(lèi)物質(zhì)保鮮細菌、真菌和藍藻類(lèi)產(chǎn)生的微生物多糖,因其安全無(wú)毒、理化性質(zhì)獨特等而倍受關(guān)注。微生物大量產(chǎn)生的多糖,易與菌體分離,可通過(guò)深層發(fā)酵實(shí)現工業(yè)化生產(chǎn)。微生物多糖已作為成膜劑、保鮮劑應用于食品、制藥等多個(gè)領(lǐng)域。例如普魯蘭多糖因其無(wú)味、無(wú)嗅、無(wú)毒、可食用,良好的成膜性,以及優(yōu)良的阻氧效果,可用于食品保鮮作用。從蝦、蟹、昆蟲(chóng)等節肢動(dòng)物的外殼及真菌、藻類(lèi)等低等植物細胞壁中的早殼素經(jīng)酸化所得的含氮多糖類(lèi)物質(zhì)即殼聚糖,因其具有良好的成膜性與抑菌作用而應用于果蔬的保鮮。對柑橘、草莓、蘋(píng)果、獼猴桃、黃瓜、青椒、番茄的保鮮試驗可知[1]:只需017%~2%的殼聚糖的溶液噴灑在果蔬的表面即可在果實(shí)表面形成一層薄膜,可阻止果實(shí)吸收O2與CO2的排出,從而延緩果實(shí)的熟化,達到保鮮的目的
菌種保藏是食用菌產(chǎn)業(yè)的一項基礎工作,是確保野生種質(zhì)資源基因留存和現有生產(chǎn)用種遺傳性能相對穩定的必要手段。
菌種保藏的方法多種多樣,有的雖然保藏效果好,但投資高或操作繁雜。在生產(chǎn)實(shí)踐中,更需要設備投入少,能保障菌種不死亡、不污染、最大限度地保持優(yōu)良種性的簡(jiǎn)便方法,如斜面低溫短期保藏和自然基質(zhì)較長(cháng)期保藏相結合的方法。
一般而言,對母種進(jìn)行長(cháng)期保存,對原種進(jìn)行短期保存。須保證優(yōu)良菌種的性狀和活力不發(fā)生變異,不死亡,不被污染,確保其純度。
因此,保存方法應具備取材容易、操作方便、菌種不易退化、長(cháng)期保存不污染雜菌等優(yōu)點(diǎn)。常用的菌種保存方法如下:(一)斜面低溫保藏 該法的優(yōu)點(diǎn)是保藏方便且所占空間較小。
具體做法是:菌絲長(cháng)滿(mǎn)斜面后,放在0~5℃保存。以后每隔一定時(shí)間(2~3個(gè)月)轉管一次。
轉管保存不能長(cháng)期用PDA培養基,否則種性易退化,灰樹(shù)花降解木質(zhì)纖維素的能力減弱。因此隔一定時(shí)間(1年左右)須把菌種轉接到木屑培養基上復壯,之后挑選健壯無(wú)污染的菌絲再轉回PDA培養基保存。
在長(cháng)期保存過(guò)程中,要防棉塞受潮滋生雜菌。菌種試管口最好用蠟燙封,以防培養基內水分過(guò)快蒸發(fā)。
增加瓊脂用量(2.5%~3%)可減緩水分蒸發(fā)。還要防止菌種管上的標簽脫落而造成種系混雜。
斜面低溫保藏方法簡(jiǎn)便易行,能隨時(shí)觀(guān)察保藏菌株的活力和純度,一旦染雜,肉眼能及時(shí)發(fā)現。(二)自然基質(zhì)保藏 此法是根據灰樹(shù)花的特性,利用自然基質(zhì)保藏其菌種的方法。
灰樹(shù)花是木腐菌,可以采用以木屑為主料的培養基。自然基質(zhì)營(yíng)養全面,且大部為緩釋養分,不易產(chǎn)生營(yíng)養過(guò)剩或饑餓;其次,培養基理化性狀好,可吸收或緩沖菌絲代謝出的有害物質(zhì),水分與通氣協(xié)調平衡,部分菌絲扎入基質(zhì)內生長(cháng),不裸露于空氣中,菌絲呼吸強度低,生命力強。
1.原料與配方 粗、細木屑比例適當,采用板栗樹(shù)木屑最佳,粗木屑粒徑為2毫米左右,細木屑為一般圓盤(pán)鋸屑,粗、細的比例為1∶2,添加干木屑重量20%的麩皮和1%的糖,含水率為60%左右。這樣的基質(zhì)通氣性好,營(yíng)養豐富且供菌絲分解利用的時(shí)間長(cháng),長(cháng)到基質(zhì)內部的菌絲比包裹在基質(zhì)外部暴露于空氣中的菌絲耐受性強。
不同粒徑的基質(zhì)比例適當,還能協(xié)調氣與水的矛盾。粗粒過(guò)多,架空菌絲多;細粒過(guò)多,透氣性差,菌絲生長(cháng)慢。
應用配方如下:栗木屑78%,麩皮20%,石膏1%,蔗糖1%,水65%配料,裝入較粗大的試管中,裝料量為試管的1/3~1/2,1.5千克/厘米2滅菌1.5小時(shí)。冷卻后,接入需保藏的菌種,在28℃下培養,待菌絲長(cháng)滿(mǎn)木屑培養基時(shí)取出換上無(wú)菌橡皮塞,在0~5℃冰箱內保藏1~2年轉管一次。
2.容器與裝量 采用容量250毫升的葡萄糖玻璃瓶,清洗潔凈,裝量一般不超過(guò)玻璃瓶容量的3/5,填料不能過(guò)滿(mǎn),瓶壁所殘留的顆粒須擦拭干凈,否則保藏的菌種易引起污染。3.滅菌和冷藏 滅菌時(shí)若采用棉塞封口,基質(zhì)表層易失水,接種成活率低,即使菌絲復活,生長(cháng)也很緩慢,所以最好采用聚丙烯膜封口,接種后換用無(wú)菌棉塞培養,待菌絲長(cháng)滿(mǎn)后再換成有孔滅菌膠塞冰箱保藏。
用上述方法保藏的菌種經(jīng)3年貯放后,接出成活率均達90%以上,出菇驗證產(chǎn)量及子實(shí)體形態(tài)特征均無(wú)明顯變化。因此,自然基質(zhì)保藏法具有保存期長(cháng),菌種遺傳性能相對穩定的特點(diǎn)。
(三)木粒PDA斜面保藏 灰樹(shù)花在自然狀態(tài)下易發(fā)生于栗樹(shù)根部,這說(shuō)明其營(yíng)養需求較為特殊。根據灰樹(shù)花這種習性,在PDA基礎上添加適量的栗樹(shù)木粒制成母種培養基。
在多年的使用中發(fā)現,用該培養基培養的母種生長(cháng)勢好,在轉接原種時(shí),適應能力強,萌發(fā)定植快;用作菌種保藏基質(zhì)時(shí),保藏時(shí)間長(cháng),并能很好保持菌種的優(yōu)良性狀。1.木粒PDA的制作 選取栗樹(shù)邊材,加工成0.3~0.5厘米的顆粒,及時(shí)烘干或曬干備用。
稱(chēng)取葡萄糖10克,KH2PO41克,1溶解于1升清水中配制成營(yíng)養液。將營(yíng)養液倒入盛有木粒的小鋁鍋中,營(yíng)養液以完全浸沒(méi)木粒為準。
煮沸10分鐘,以加快木粒對營(yíng)養液的吸收速度,起鍋靜置30分鐘讓木粒吸足營(yíng)養液。撈出木粒,瀝掉表面的水,裝入試管,裝量為試管長(cháng)的1/6,最多不得超過(guò)試管長(cháng)的1/5,否則在擺制斜面時(shí),不易使木粒均勻分散于斜面的表面上。
選取新鮮的馬鈴薯,去皮并切成薄片,稱(chēng)取200克放入小鋁鍋中,加入1升清水,文火煮沸30分,趁熱過(guò)濾取汁,并補足1升的體積。稱(chēng)取瓊脂20克,葡萄糖20克,KH2PO4 2克,MgSO47H2O 2克。
先將瓊脂剪碎,加入到馬鈴薯濾液中,繼續用文火加熱,使瓊脂溶化。待瓊脂完全溶化后,加入稱(chēng)好的其他3種營(yíng)養成分,攪拌使這些物質(zhì)溶解均勻,趁熱裝入已裝有木粒的試管中,裝至試管長(cháng)的1/3處,塞上棉塞。
在0.8~1千克/厘米2蒸氣壓下滅菌40分,待氣壓降至0時(shí),開(kāi)蓋取出,趁熱輕輕抖拍試管,使木粒分散后即可擺制斜面,并使木粒呈半裸狀分布于斜面上,待凝固后便制成了木粒PDA培養基。2.生長(cháng)及保藏效果 木粒PDA斜面上培養的灰樹(shù)花母種,菌絲生長(cháng)迅速、良好,12天即可長(cháng)滿(mǎn)試管,但菌絲的后期生長(cháng)勢更為粗壯、濃密,后勁足。
轉接原種時(shí),菌種適應力強,定植快。這表明,灰樹(shù)花菌絲的生長(cháng)速度、生長(cháng)勢不僅取決于本身的遺。
微生物檢驗材料的保存方法如下:(1)液體樣品。
黏液、滲出物、膽汁、血液等,最好收集 在滅菌的小試管或青霉素瓶中,密封后用紙或棉花包裹,裝人較 大的容器中,再裝瓶(或盒)送檢。(2)做棉試蘸取的鼻液、濃汁、糞便等樣品。
應將每支棉 試剪斷或燒斷,投入滅菌試管內,立即密封管口,包裝送檢。(3)實(shí)質(zhì)臟器。
在短時(shí)間內(夏季不超過(guò)20小時(shí),冬季不 超過(guò)2天)能送到檢驗單位的,可將樣品的容器放在裝有冰決的 保溫瓶?jì)人蜋z。短時(shí)間不能送到的,供細菌檢查的,放于滅菌流 動(dòng)石蠟或滅菌的甘油生理鹽水中保存;供病毒檢查的,放 于滅菌的50%甘油生理鹽水中保存。
食物種類(lèi)繁多,性質(zhì)各異,適應的環(huán)境各不相同。因此儲存食物首先要熟悉各種食物的特點(diǎn).了解影響食物變化的原因,采取適當的存儲方法。只有這樣才能有效保持食物的外觀(guān)(形狀、色澤)和內在的質(zhì)量(質(zhì)地、營(yíng)養成分),防止烹飪食物發(fā)生腐爛、腐敗、變質(zhì)等情況,減少不必要的損失,避免浪費。
一、低溫儲存法
低溫儲存法是儲存烹飪食物級常用的方法。其主要原理是通過(guò)低溫有效地抑制微生物的生長(cháng)和繁殖,降低酶的活性,減弱食物內的化學(xué)反應,較好的保持食品原有的風(fēng)味和營(yíng)養價(jià)值。
低溫儲存按其溫度的不同可分為冷藏法和冷凍法,冷藏的溫度是在冰點(diǎn)以上。
采用冷藏的食物主要有蔬菜、鮮肉、鮮魚(yú)、水果、奶制品以及熟制品和半成品等食物。冷凍法是將食物在低于冰點(diǎn)的環(huán)境中凍結,適用于儲存動(dòng)物性食物等。冷凍法可以使食物保存較長(cháng)的時(shí)間不變質(zhì)。但是長(cháng)時(shí)間存放,雖然食物的質(zhì)且變化不大.但水分減少,其背養價(jià)值降低,吃起來(lái)口感也不好。另外,兩種以上食物存放在同一個(gè)冷凍箱內時(shí),要用無(wú)毒害的食品袋密封隔離。預防氣味相互污染.同時(shí)也可減少食物水分的流失。
二、高溫儲存法
高溫儲存法是餐飲業(yè)儲存食物經(jīng)常使用的方法,因為微生物對高溫的承受能力弱,當溫度提高時(shí)可有效地殺滅微生物.并破壞酶的活性.可防止微生物對食物的影響,達到儲存食物的目的。其方法是先將食物用開(kāi)水煮透或蒸透(達到100度以上的高溫),取出或仍用原湯泡上.放在涼爽通風(fēng)的地方不攪動(dòng),防止食物重新被污染。采用此方法可使食物在較長(cháng)的時(shí)間內不變質(zhì)。這種方法適用于保存動(dòng)物性食物的成品和半成品以及水發(fā)干貨類(lèi)等食物。
三、通風(fēng)儲存法
通風(fēng)儲存法主要適用于保存糧食、干貨食物和需要風(fēng)干的食物.它們的特點(diǎn)都是怕霉、怕捂。例如米、面、花生、蔬菜等食物,在儲存的時(shí)候都需要通風(fēng).這樣可使霉菌不易生長(cháng),保持食物的原有成分,減少霉變。
四、腌、漬、醬、泡儲存法
此種方法一般是用鹽、糖、醋、醬和五香料,按照一定的比例方法加人食物內,使食物吸收一定的濃度。來(lái)抑制微生物的生長(cháng).達到長(cháng)期保存食物的目的。例如:腌菜制品有咸蘿卜條、咸豆角、糖醋蒜等。醬菜制品有醬五香大頭菜、醬黃瓜、醬八寶菜等。泡菜制品有泡洋白菜、泡辣椒、泡茄子等。
通過(guò)腌、漬、醬、泡等處理后的食物,一般營(yíng)養價(jià)值會(huì )降低,因為食物中一部分維生素、無(wú)機鹽被破壞和損失.特別是動(dòng)物性食物的纖維肌會(huì )變硬.不易被人體吸收消化。但是加工烹調后香味濃郁,口味極好。這種儲存食物的方法簡(jiǎn)單易行,在飲食行業(yè)中得到廣泛應用。
五、煙熏儲存法
煙熏是用鋸未、松拍枝等材料,在不完全燃燒的情況下所產(chǎn)生的煙氣來(lái)熏烤食品的一種方法,經(jīng)煙熏后的食物不但減少了食物內部的水分,而且煙氣中有殺菌和防腐作用的木焦油、雜酚油等附在食物的表面上.能防止細菌的生長(cháng),從而達到防腐儲存的作用,一般常見(jiàn)的熏制品有熏魚(yú)、熏雞、熏肉等。
六、真空密封保存方法
真空密封保存方法是使食物在真空的狀態(tài)下,不與空氣中的微生物接觸.進(jìn)行密封保存食物的一種方法,如罐裝制品、真空包裝制品等。此方法適用于多種食物的保存。
隨著(zhù)科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展,儲存食物的方法也越來(lái)越多,如核輻射儲存法、氣調
法等都是比較先進(jìn)的方法,它們的主要原理就是控制或殺死食物中生長(cháng)的微生物,延緩原料內部組織新陳代謝,從而延長(cháng)食物的保存時(shí)間,提高儲存的質(zhì)量,達到保存的目的。
基因重組的材料是基因片段(含有目的基因)。那么,這些用于基因重組的基因片段是怎樣保存的呢?生命體的細胞中含有該生物遺傳的全部密碼。為了改造某一生物,把含有目的基因的片段導入該生物的細胞中去,才能培育出帶有外源基因的轉基因生物(動(dòng)物、植物或微生物)。問(wèn)題是這個(gè)含有外源基因的片段,不是隨時(shí)隨地可以覓到的,必須事先保存在一個(gè)地方,這就是基因文庫。它是存放基因的“倉庫”。
生物的全部基因就在細胞內的DNA上,這是一條很長(cháng)的鏈。指揮生物的一切秘密全在上面。遺傳工程科學(xué)家為了基因重組方便,就采取先把一種生物細胞中的全部DNA或染色體上的DNA的所有片段,隨機地連接到基因載體上,然后移植到宿主細胞中進(jìn)行增殖,形成各個(gè)片段的無(wú)性繁殖系。這樣,該生物的全部基因片段就在宿主細胞內一個(gè)不留地全部復制出來(lái)。
這好比拍電影,先拍分鏡頭(相當于基因片段),拍好全部鏡頭后進(jìn)行剪接,配上錄音,就是一部電影了。有了這個(gè)電影片子,就可以復制出許許多多相同內容的電影。
從70年代起,科學(xué)家已建立了大腸桿菌、酵母菌、果蠅、雞、兔以及大豆、水稻等多種生物的基因文庫。我們要取這些生物的任何一個(gè)基因片段進(jìn)行重組,都非常容易了。
用于偵破的基因指紋
大家知道,在現代偵破手段中,利用指紋尋找罪犯,捉拿兇手,是非常有效的。這是因為世界上幾乎沒(méi)有兩個(gè)人的指紋是相同的。不同的指紋,實(shí)際就代表不同的人。只要在自己的指頭上涂以油墨或者印泥,捺在白紙上就能印出清楚的指紋。因此,在犯罪現場(chǎng)尋覓指紋是極其重要的任務(wù)。
現在還有利用基因指紋作為偵破手段的。基因指紋是遺傳學(xué)上的概念。原來(lái),人的基因雖然大體上都是一致的,但是仍有不同,而且同樣找不出兩個(gè)人會(huì )有相同的基因(雙胞胎也有微小區別)。根據基因密碼,經(jīng)過(guò)特殊處理,也會(huì )顯示出如同條形碼那樣的紋形——黑白相間,這就是基因指紋。
現代科學(xué)技術(shù)能從一滴血、一根頭發(fā)或者一口唾液中發(fā)現基因指紋。如果是一個(gè)殺人犯,他在與被害者搏斗過(guò)程中,很可能弄破自己的皮膚而留下極少的血跡。刑偵人員從血跡中就可以找到基因指紋。當刑偵人員從疑犯身上獲得基因指紋,如與現場(chǎng)血跡的基因指紋一致,那么疑犯就成了百分之百的兇手。至于對強奸犯的偵破,利用精液獲得基因指紋,在國外已經(jīng)成了常用的偵破手段。
基因指紋用于現代偵破雖然歷史還很短,但已經(jīng)受到特別的重視。
專(zhuān)利申請涉及從未公開(kāi)過(guò)的生物材料(如質(zhì)粒、細菌、真菌、藻類(lèi)、動(dòng)植物細胞系等)的,須在專(zhuān)利申請同時(shí)或申請日起四個(gè)月內向國家知識產(chǎn)權局提交其認可單位出具的生物材料保藏和存活證明。
不需要保藏的生物材料:在國內外商業(yè)上公眾能買(mǎi)到的生物材料;各國專(zhuān)利局或國際專(zhuān)利組織指定的用于專(zhuān)利程序的保藏機構保藏的生物材料,在向我國提交的專(zhuān)利申請享有的優(yōu)先權日或申請日前已在專(zhuān)利公告中公布或已授權的,均不用保藏。
需要保藏的生物材料:個(gè)人或單位持有的,在非用于專(zhuān)利程序保藏機構保藏的,并對公眾不公開(kāi)發(fā)放的,或在申請日(優(yōu)先權日)前公眾不能得到的,如通過(guò)篩選、突變、重組DNA等手段新創(chuàng )制的生物材料,均要求保藏。
聲明:本網(wǎng)站尊重并保護知識產(chǎn)權,根據《信息網(wǎng)絡(luò )傳播權保護條例》,如果我們轉載的作品侵犯了您的權利,請在一個(gè)月內通知我們,我們會(huì )及時(shí)刪除。
蜀ICP備2020033479號-4 Copyright ? 2016 學(xué)習?shū)B(niǎo). 頁(yè)面生成時(shí)間:3.047秒