做細胞實(shí)驗的方法(生物的實(shí)驗方法)
1.生物的實(shí)驗方法有哪些
(1)顯微觀(guān)察法，如觀(guān)察植物細胞有絲分裂、觀(guān)察葉綠體和細胞質(zhì)流動(dòng)、觀(guān)察植物細胞質(zhì)壁分離和復原實(shí)驗等.
(2)觀(guān)色法，如觀(guān)察動(dòng)物毛色和植物花色的遺傳等.
(3)原子示綜法，如噬菌體浸染細菌的實(shí)驗，用18O2和14CO2追蹤光合作用中氧原子和碳原子轉移途徑的實(shí)驗等.
(4)等組實(shí)驗法，如小麥淀粉酶催化淀粉水解的實(shí)驗，發(fā)現生長(cháng)素的燕麥胚芽鞘實(shí)驗等.
(5)加法創(chuàng )意法，如用飼喂法研究甲狀腺激素，用注射法研究動(dòng)物胰島素和生長(cháng)激素，用移植法研究性激素等.
(6)減法創(chuàng )意法，如用閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素和生長(cháng)激素的實(shí)驗，雌蕊受粉后除去正在發(fā)育著(zhù)的種子等.
(7)雜交實(shí)驗法，如孟德?tīng)柊l(fā)現遺傳定律的植物雜交、測交的實(shí)驗，小麥的雜交等.
(8)化學(xué)分析法，如番茄和水稻對Ca和Si選擇性吸收，葉綠體中色素的提取和分離實(shí)驗等.
(9)理論分析法，如大、小兩種草履蟲(chóng)競爭的實(shí)驗，植物根向地生長(cháng)、莖背地生長(cháng)的實(shí)驗，植物向光性實(shí)驗等.
(10)模擬實(shí)驗法，如滲透作用的實(shí)驗裝置，分離定律的模擬實(shí)驗等
2.初中生物實(shí)驗方法有哪些
實(shí)驗方法是整個(gè)實(shí)驗設計的精髓，是做好實(shí)驗設計的關(guān)鍵所在.現將與中學(xué)實(shí)驗有關(guān)的一些最常見(jiàn)的經(jīng)典的實(shí)驗方法匯總如下：
(1)化學(xué)物質(zhì)的檢測方法：
①淀粉——碘液
②還原糖——斐林試劑、班氏試劑
③CO2——Ca(OH)2溶液或酸堿指示劑
④乳酸——pH試紙
⑤O2——余燼復燃
⑥無(wú)O2——火焰熄滅
⑦蛋白質(zhì)——雙縮脲試劑
⑧染色體——龍膽紫、醋酸洋紅溶液
⑨DNA——二苯胺試劑
⑩脂肪——蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液
(2)實(shí)驗結果的顯示方法：
①光合速率——O2釋放量或CO2吸收量或淀粉產(chǎn)生量
②呼吸速率——O2吸收量或CO2釋放量或淀粉減少量
③原子途徑——放射性同位素示蹤法
④細胞液濃度大小——質(zhì)壁分離
⑤細胞是否死亡——質(zhì)壁分離
⑥甲狀腺激素作用——動(dòng)物耗氧量，發(fā)育速度等
⑦生長(cháng)激素作用——生長(cháng)速度（體重變化，身高變化）
⑧胰島素作用——動(dòng)物活動(dòng)狀態(tài)
⑨菌量——菌落數或亞甲基藍溶液褪色程度
⑩大腸桿菌——伊紅—美藍瓊脂培養基
(3)實(shí)驗條件的控制方法：
①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物
②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開(kāi)水
③除去容器中CO2——NaOH溶液
④除去葉片中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境
⑤除去葉片中葉綠素——酒精隔水加熱
⑥除去光合作用對呼吸作用的干擾——給植株遮光
⑦如何得到單色光——棱鏡色散或彩色薄膜濾光
⑧血液抗凝——加入檸檬酸鈉
⑨線(xiàn)粒體提取——細胞勻漿離心
⑩骨的脫鈣——鹽酸溶液
⑾滅菌方法——微生物培養的關(guān)鍵在于滅菌，對不同材料，滅菌方法不同：培養基用高壓蒸氣滅菌；接種環(huán)用火焰灼燒滅菌；雙手用肥皂洗凈，擦干后用75%酒精消毒；整個(gè)接種過(guò)程都在實(shí)驗室無(wú)菌區進(jìn)行.
(4)實(shí)驗中控制溫度的方法：
①還原糖鑒定：水浴煮沸加熱
②酶促反應：水浴保溫
③用酒精溶解葉中的葉綠素：酒精要隔水加熱
④DNA的鑒定：水浴煮沸加熱
⑤細胞和組織培養以及微生物培養：恒溫培養
3.高中生物常用的實(shí)驗方法有哪些
1.實(shí)驗方法 實(shí)驗方法是整個(gè)實(shí)驗設計的精髓，是做好實(shí)驗設計的關(guān)鍵所在。
現將與中學(xué)實(shí)驗有關(guān)的一些最常見(jiàn)的經(jīng)典的實(shí)驗方法匯總如下： （1）化學(xué)物質(zhì)的檢測方法： ①淀粉——碘液 ②還原糖——斐林試劑、班氏試劑 ③CO2——Ca(OH)2溶液或酸堿指示劑 ④乳酸——pH試紙 ⑤O2——余燼復燃 ⑥無(wú)O2——火焰熄滅 ⑦蛋白質(zhì)——雙縮脲試劑 ⑧染色體——龍膽紫、醋酸洋紅溶液 ⑨DNA——二苯胺試劑 ⑩脂肪——蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液 （2）實(shí)驗結果的顯示方法： ①光合速率——O2釋放量或CO2吸收量或淀粉產(chǎn)生量 ②呼吸速率——O2吸收量或CO2釋放量或淀粉減少量 ③原子途徑——放射性同位素示蹤法 ④細胞液濃度大小——質(zhì)壁分離 ⑤細胞是否死亡——質(zhì)壁分離 ⑥甲狀腺激素作用——動(dòng)物耗氧量，發(fā)育速度等 ⑦生長(cháng)激素作用——生長(cháng)速度（體重變化，身高變化） ⑧胰島素作用——動(dòng)物活動(dòng)狀態(tài) ⑨菌量——菌落數或亞甲基藍溶液褪色程度 ⑩大腸桿菌——伊紅—美藍瓊脂培養基 （3）實(shí)驗條件的控制方法： ①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物 ②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開(kāi)水 ③除去容器中CO2——NaOH溶液 ④除去葉片中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境 ⑤除去葉片中葉綠素——酒精隔水加熱 ⑥除去光合作用對呼吸作用的干擾——給植株遮光 ⑦如何得到單色光——棱鏡色散或彩色薄膜濾光 ⑧血液抗凝——加入檸檬酸鈉 ⑨線(xiàn)粒體提取——細胞勻漿離心 ⑩骨的脫鈣——鹽酸溶液 ⑾滅菌方法——微生物培養的關(guān)鍵在于滅菌，對不同材料，滅菌方法不同：培養基用高壓蒸氣滅菌；接種環(huán)用火焰灼燒滅菌；雙手用肥皂洗凈，擦干后用75%酒精消毒；整個(gè)接種過(guò)程都在實(shí)驗室無(wú)菌區進(jìn)行。 （4）實(shí)驗中控制溫度的方法： ①還原糖鑒定：水浴煮沸加熱 ②酶促反應：水浴保溫 ③用酒精溶解葉中的葉綠素：酒精要隔水加熱 ④DNA的鑒定：水浴煮沸加熱 ⑤細胞和組織培養以及微生物培養：恒溫培養 2.斐林試劑、班氏試劑與尿糖試紙 這三種物質(zhì)均可用來(lái)檢驗含醛基的有機物的存在，在醫學(xué)上用來(lái)檢驗糖尿病，其原理均是利用了Cu2+的氧化性把醛基氧化，但成分略有不同： 斐林試劑：即硫酸銅、氫氧化鈉和酒石酸鉀鈉組成的藍色混合溶液。
分為斐林試劑A和斐林試劑B,A為CuSO4溶液，B為氫氧化鈉和酒石酸鉀鈉的混合溶液，使用時(shí)將A、B等體積混合即成斐林試劑。 班氏試劑：即硫酸銅、碳酸鈉和檸檬酸鈉組成的混合液，又叫本尼迪克特（Benedict）試劑，它與醛反應的結果是與斐林試劑一致的，只是比斐林試劑更穩定，所以在臨床化驗中更常使用。
尿糖試紙：又叫硫酸銅試紙，呈白色，帶藍色斑點(diǎn)，用于糖尿病患者的尿糖測試。每片含硫酸銅20毫克，枸櫞酸300毫克，碳酸鈉80毫克，氫氧化鈉235毫克。
尿糖試紙法快速、方便，試紙的正確使用方法為：將試紙條放在尿液中浸濕，一秒鐘后取出，在一分鐘內觀(guān)察試紙的顏色，并與標準色板對照，根據不同的顏色來(lái)確定尿糖陽(yáng)性的程度。 3.斐林試劑和雙縮脲試劑的比較 相同點(diǎn)：①都由NaOH溶液和CuSO4溶液構成； ②斐林試劑甲液和雙縮脲試劑A都為0.1g/mLNaOH溶液。
不同點(diǎn)：①CuSO4溶液濃度不一樣：斐林試劑乙液為0.05g/mLCuSO4溶液， 雙縮脲試劑B為0.01g/mLCuSO4溶液。 ②配制比例不一樣。
③使用方法不一樣：斐林試劑是甲、乙液一起混合后再使用， 雙縮脲試劑則是先向待鑒定材料加入A試劑搖勻后，再加入試劑B。 ④鑒定的對象不一樣：斐林試劑鑒定的是還原糖，雙縮脲試劑鑒定的是蛋白質(zhì)。
⑤反應本質(zhì)及顏色反應不一樣。 4.蘇丹Ⅲ染液與蘇丹Ⅳ染液的比較 都是用來(lái)鑒定脂肪。
蘇丹Ⅳ染液更易溶于脂肪，所以染色更深，同時(shí)要求染色時(shí)間更短。 生物學(xué)中常用的試劑： 1、斐林試劑： 成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.05g/ml CuSO4（乙液）。
用法：將斐林試劑甲液和乙液等體積混合，再將混合后的斐林試劑倒入待測液，水浴加熱或直接加熱，如待測液中存在還原糖，則呈磚紅色。 2、班氏糖定性試劑：為藍色溶液。
和葡萄糖混合后沸水浴會(huì )出現磚紅色沉淀。用于尿糖的測定。
3、雙縮脲試劑：成分：0.1g/ml NaOH（甲液）和0.01g/ml CuSO4（乙液）。用法：向待測液中先加入2ml甲液，搖勻，再向其中加入3~4滴乙液，搖勻。
如待測中存在蛋白質(zhì)，則呈現紫色。 4、蘇丹Ⅲ：用法：取蘇丹Ⅲ顆粒溶于95%的酒精中，搖勻。
用于檢測脂肪。可將脂肪染成橘黃色（被蘇丹Ⅳ染成紅色）。
5、二苯胺：用于鑒定DNA。DNA遇二苯胺（沸水浴）會(huì )被染成藍色。
6、甲基綠：用于鑒定DNA。DNA遇甲基綠（常溫）會(huì )被染成藍綠色。
（甲基綠使DNA呈現綠色，吡羅紅使RNA呈現紅色。） 7、50%的酒精溶液：在脂肪鑒定中，用蘇丹Ⅲ染液染色，再用50%的酒精溶液洗去浮色。
8、75%的酒精溶液：用于殺菌消毒，75%的酒精能滲入細胞內，使蛋白質(zhì)凝固變性。低于這個(gè)濃度，酒精的滲透脫水作用減弱，殺菌力不強；而高于這個(gè)濃度，則會(huì )使細菌表面蛋白質(zhì)迅速脫水，凝固成膜，妨礙酒精透入，削弱殺菌能力。
75%的酒精溶液常用于手術(shù)前、打針、換藥、針灸前皮膚脫碘消毒以及機。
4.生物實(shí)驗有多少種實(shí)驗方法
1.顯微觀(guān)察法：如“觀(guān)察細胞有絲分裂”“觀(guān)察葉綠體和細胞質(zhì)流動(dòng)”“用顯微鏡觀(guān)察多種多樣的細胞”等.
2.觀(guān)色法：如“生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的鑒定”“觀(guān)察動(dòng)物毛色和植物花色的遺傳”“DNA和RNA的分布”等.
3.同位素標記法（元素示蹤法）：如“噬菌體浸染細菌的實(shí)驗”“恩格爾曼實(shí)驗”等.
4.補充法：如用飼喂法研究甲狀腺激素，用注射法研究動(dòng)物胰島素和生長(cháng)激素，用移植法研究性激素等.
5.摘除法：如用“閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素或生長(cháng)激素的作用”“雌蕊受粉后除去正在發(fā)育著(zhù)的種子”等.
6.雜交法：如植物的雜交、測交實(shí)驗等.
7.化學(xué)分析法：如“番茄對Ca和Si的選擇吸收”“葉綠體中色素的提取和分離”等.
8.理論分析法：如“大、小兩種草履蟲(chóng)的競爭實(shí)驗”“植物向性動(dòng)物的研究”等.
9.模擬實(shí)驗法：如“滲透作用的實(shí)驗裝置”“分離定律的模擬實(shí)驗”等.
10.引流法：臨時(shí)裝片中液體的更換，用吸水紙在一側吸引，于另一側滴加換進(jìn)的液體.
5.細胞生物學(xué)實(shí)驗中常用來(lái)固定細胞或細胞器的方法有哪些
細胞固定化方法有：Adsorption（吸附）；covalent bonding（共價(jià)結合）；Cross linking（交聯(lián)）；Entrapment（包埋）、Encapsulation（微膠囊） 。下面對這幾種做具體介紹。
一、吸附法
1，原理
利用載體和細胞表面所帶電荷的靜電引力（van der Walls forces），使細胞吸附于載體上。吸附法可分為物理吸附和離子吸附兩種。該法操作簡(jiǎn)單，固定化過(guò)程對細胞活性影響小。
2，載體的材料
采用吸附法固定細胞，所用的載體主要有：硅藻土、木屑、多孔玻璃、活性炭、
多孔陶瓷、離子交換樹(shù)脂和等。塑料
3，影響吸附固定化的因素
(1)Z-電位
(2)細胞的性質(zhì)和細胞壁的組成
(3)載體的性質(zhì)
(4)pH
二、共價(jià)結合法
利用細胞表面的反應基團（如氨基、羧基、羥基、巰基、咪唑基）與活化的無(wú)機或有機載體反應，形成共價(jià)鍵將細胞固定。用該法制備的固定化細胞一般為死細胞。
三、交聯(lián)法
利用雙功能或多功能試劑與細胞表面的反應基團（如氨基、羧基、羥基、巰基、咪唑基）反應，從而使細胞固定。常用的交聯(lián)劑包括：戊二醛、甲苯二異氰酸酯、雙重氮聯(lián)苯胺。
由于交聯(lián)試劑的毒性，這一方法具有一定的局限性。
四、包埋法
包埋法是細胞固定化最常用的方法。包埋法可以分為：
1，微膠囊法：利用半透性聚合物薄膜將細胞包裹起來(lái)，形成微型膠囊；
2，凝膠包埋法：是在無(wú)菌條件下，將生物細胞和膠溶液混合在一起，然后再經(jīng)過(guò)相應的造粒處理，形成直徑為1-4mm的膠粒。
常用的包埋劑為：聚丙烯酰胺、瓊脂、海藻酸、卡拉膠、二醋酸纖維、三醋酸纖維、明膠等。
五、固定化方法的比較
吸附法：條件溫和、方法簡(jiǎn)便、載體可再生。但操作穩定性差。
共價(jià)法：操作穩定性高。但由于試劑的毒性，易引起細胞的破壞。
交聯(lián)法：可得到高細胞濃度，但機械強度低，無(wú)法再生，不適于實(shí)際應用。
包埋法：細胞和載體間沒(méi)有束縛，固定化后，細胞仍保持較高活力。但這類(lèi)方法只適用于小分子底物。
6.研究細胞有什么方法
細胞生物學(xué)的研究方法： 1. 顯微成像包括直接成像和間接成像。
顯微技術(shù)是細胞生物學(xué)最基本的研究技術(shù)， 包括光學(xué)顯微技術(shù)和電子顯微技術(shù)。在光學(xué)顯微技術(shù)中要掌握幾種常用顯微鏡成像的基本原理，包括普通雙筒顯微鏡、熒光顯微鏡、相差顯微鏡、暗視野顯微鏡、倒置顯微鏡。
2. 細胞化學(xué)技術(shù)：酶細胞化學(xué)技術(shù)、免疫細胞化學(xué)技術(shù)、細胞分選技術(shù)， 其中流式細胞分選技術(shù)是細胞生物學(xué)和現代生物技術(shù)中的重要技術(shù)。 3. 細胞工程技術(shù)是細胞生物學(xué)與遺傳學(xué)的交叉領(lǐng)域，主要利用細胞生物學(xué)的原理和方法，結合工程學(xué)的技術(shù)手段，按照人們預先的設計，有計劃地改變或創(chuàng )造細胞遺傳性的技術(shù)。
包括體外大量培養和繁殖細胞，或獲得細胞產(chǎn)品、或利用細胞體本身。主要內容包括：細胞融合、細胞生物反應器、染色體轉移、細胞器移植、基因轉移、細胞及組織培養。
4. 分離技術(shù)是一大類(lèi)技術(shù)的總稱(chēng)，包括細胞組分的分離和生物大分子的分離， 。 5.分子生物學(xué)方法。
7.探究植物細胞的吸水和失水實(shí)驗的實(shí)驗方法有哪些
一、實(shí)驗準備
（一）材料：長(cháng)得較粗壯的幼苗，蘿卜條或馬鈴薯條。
（二）用品：燒杯，試管，清水，鹽水。
二、方法步驟
（一）取兩塊蘿卜條或馬鈴薯條，分別放人盛有清水和鹽水的燒杯中浸泡，過(guò)一段時(shí)間取出，可見(jiàn)清水中的蘿卜條硬挺，而鹽水中的蘿卜條則軟縮。這表明植物細胞可以吸水，也可以失水，并且吸水和失水與環(huán)境中溶液的濃度有關(guān)系。應注意此實(shí)驗最好是在課前做好，或在上一節課時(shí)布置給學(xué)生。實(shí)驗過(guò)程需要約20min。
（二）此實(shí)驗也可用兩株植物幼苗，分別將它們的根部插在盛有清水和鹽水（或糖水）的兩個(gè)試管內，大約20min左右，從試管里取出兩棵幼苗進(jìn)行比較，可見(jiàn)清水中的幼苗硬挺，而鹽水（或糖水）中的幼苗則萎蔫了。這同樣可以證明植物細胞可以吸水，也可以失水。此實(shí)驗同時(shí)還說(shuō)明了土壤溶液濃度過(guò)大或施肥過(guò)量影響根吸收水分的道理。
三、教學(xué)建議
植物細胞吸水實(shí)驗既是教材中《根對水分的吸收》一節的演示實(shí)驗，又是這一節課的引言。本實(shí)驗大約需要20min左右的時(shí)間。因此，可以發(fā)動(dòng)學(xué)生在課前自己用生活中常用的器皿開(kāi)展實(shí)驗，然后拿到課堂上演示。在演示時(shí)，應在實(shí)驗材料的后面加一張白紙作為背景，以便使學(xué)生能觀(guān)察清楚。
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8.細胞活力測定的方法有哪些
根據每個(gè)細胞有一定的重量而設計的。
它可以用于單細胞、多細胞以及絲狀體微生物生長(cháng)的測定。將一定體積的樣品通過(guò)離心或過(guò)濾將菌體分離出來(lái)，經(jīng)洗滌，再離心后直接稱(chēng)重，求出濕重，如果是絲狀體微生物，過(guò)濾后用濾紙吸去菌絲之間的自由水，再稱(chēng)重求出濕重。
不論是細菌樣品還是絲狀菌樣品，可以將它們放在已知重量的平皿或燒杯內，于105℃烘干至恒重，取出放入干燥器內冷卻，再稱(chēng)量，求出微生物干重。如果要測定固體培養基上生長(cháng)的放線(xiàn)菌或絲狀真菌，可先加熱至50℃，使瓊脂熔化，過(guò)濾得菌絲體，再用50℃的生理鹽水洗滌菌絲，然后按上述方法求出菌絲體的濕重或干重。
除了干重、濕重反映細胞物質(zhì)重量外，還可以通過(guò)測定細胞中蛋白質(zhì)或DNA的含量反映細胞物質(zhì)的量。蛋白質(zhì)是細胞的主要成分，含量也比較穩定，其中氮是蛋白質(zhì)的重要組成元素。
從一定體積的樣品中分離出細胞，洗滌后，按凱氏定氮法測出總氮量。蛋白質(zhì)含氮量為16%，細菌中蛋白質(zhì)含量占細菌固形物的50%一80%，一般以65%為代表，有些細菌則只占13%一14%，這種變化是由菌齡和培養條件不同所產(chǎn)生的。
因此總含氮量與蛋白質(zhì)總量之間的關(guān)系可按下列公式計算：蛋白質(zhì)總量=含氮量*6.25核酸DNA是微生物的重要遺傳物質(zhì)，每個(gè)細菌的DNA含量相當恒定，平均為8.4*`10^(-5)`NG。因此從一定體積的細菌懸液中所含的細菌中提取DNA，求得DNA含量，再計算出這一定體積的細菌懸液所含的細菌總數。
