1.干熱滅菌法
1.1灼燒與火焰滅菌:灼燒主要是用于接種工具滅菌,在火焰上灼燒即可達到徹底滅菌,火焰滅菌通常用于無(wú)菌操作中,將試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反復通過(guò)火焰數次,利用火焰對管口等進(jìn)行滅菌,阻止管口污染,作為無(wú)菌操作過(guò)程中的輔助滅菌手段。
1.2干烤滅菌:利用熱輻射及干熱空氣進(jìn)行滅菌。一般將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷制品包裝后,均可在烤箱內干熱滅菌。通常加熱至160℃,保溫2h可完全滅菌。但不宜超過(guò)170℃,玻璃量具易變形。降溫過(guò)速,驟冷易引起玻璃器皿炸裂。干熱滅菌時(shí)裝入干烤箱內的物品切勿緊密,應有空隙,利于熱空氣流動(dòng),過(guò)密,致使溫度不均,部分物品滅菌不徹底。
2.濕熱滅菌法
通過(guò)加壓提高蒸汽溫度,用高壓蒸汽滅菌,穿透力強,溫度高,滅菌效果最好。
注意事項:1.完全排除高壓滅菌器內的冷空氣。有冷空氣存在時(shí),在同一表壓下所達到的溫度值要低,而冷空氣排出越少,溫度就低得越多。在高壓蒸汽滅菌時(shí),為保證達到規定的溫度,必須將冷空氣完全排除。否則,雖然壓力達到,而溫度達不到規定的要求,滅菌就不徹底。
3.紫外線(xiàn) 殺菌譜廣,但穿透力弱,影響因素多,殺菌效能受到一定限制。
紫外線(xiàn)消毒效果與紫外線(xiàn)強度、照射時(shí)間、溫度與濕度等因素有關(guān)。
我國規定紫外燈照射強度距離1m處不低于70μw/cm2。一般紫外燈使用超過(guò)100h,則應更換。表面有塵土,降低滅菌效果。紫外燈殺菌的溫度以20~40℃,相對濕度40%~60%為宜。
熱力滅菌利用高溫殺死微生物的方法,稱(chēng)為熱力滅菌。
當高溫作用于微生物細胞時(shí),首先引起生物細胞內原生質(zhì)膠體的變性,酶結構的破壞,從而使細胞失去了生活功能上的協(xié)調,停止生長(cháng)發(fā)育,隨著(zhù)高溫的繼續作用,細胞內原生質(zhì)便發(fā)生凝固,酶結構完全破壞,活性消失,生化反應停止。 滲透交換等新陳代謝活動(dòng)消失,細胞立即死亡,這就是高溫滅菌的基本原理。
不同微生物對高溫的抵抗力不同。根據微生物生長(cháng)繁殖與溫度的關(guān)系,可把它們分為3大類(lèi)群:高溫性、中溫性和低溫性。
中溫性微生物耐高溫的能力不及高溫性微生物,但大于低溫性微生物,同一種微生物的不同生理狀態(tài)對高溫的忍耐力也大不相同。 處于營(yíng)養生長(cháng)期的微生物細胞,耐熱性差,因為該細胞內各種酶系活躍,新陳代謝旺盛,細胞內自由水含量多,受熱后膠體容易變性凝固,大部分真菌、酵母和細菌的營(yíng)養體,在60°C水中加熱幾分鐘即死亡;但處于休眠體的微生物細胞,耐熱性卻很強,真菌的孢子或細菌的芽孢,因為它們酶系活動(dòng)幾乎停止,新陳代謝處在極低水平,細胞內自由水含量少,結合水含量多,受熱后芽孢蛋白質(zhì)不易發(fā)生變性,大多數芽孢桿菌和梭菌的芽孢,在沸水中煮數分鐘或數小時(shí),還能存活。
熱力滅菌經(jīng)常使用兩個(gè)殺菌指數:熱死溫度和熱死速度。前者指在10分鐘內可以殺死細菌懸液中所有細胞的溫度,后者指在一定溫度下,殺死所有細胞所需的時(shí)間。
在同樣溫度條件下,熱死溫度高的微生物,其熱死速度慢,熱死溫度低的微生物,其熱死速度快。提高滅菌溫度,可以加快熱死速度。
因此,可以通過(guò)提高滅菌溫度來(lái)縮短滅菌時(shí)間,或延長(cháng)滅菌時(shí)間以降低滅菌溫度。熱力滅菌經(jīng)濟有效,簡(jiǎn)便易行,是最普遍采用的方法。
它可以分為濕熱滅菌和干熱滅菌兩種。
(1)噴灑消毒將消毒藥用水稀釋成合適的濃度來(lái)噴灑消毒,主要用于畜禽舍、籠具、飼養場(chǎng)地、運輸工具及排泄物,周邊環(huán)境的消毒。
(2)熏蒸消毒一般用甲醛和高錳酸鉀混合后發(fā)生反應,產(chǎn)生的氣體具有強烈的刺激性氣味來(lái)達到消毒的目的,多用于密封舍的消毒和種蛋消毒。熏蒸消毒必須有較高的室溫和相對濕度,室溫不低于15℃,相對濕度為60%~80%,消毒時(shí)間為8~10小時(shí)。
(3)飲水消毒將消毒劑稀釋到合適的濃度,即將消毒藥加入一定量的水中,讓畜禽自由飲用,來(lái)消除腸道病菌。(4)浸泡消毒用于浸泡用具、器械的消毒。
1.干熱滅菌法1.1灼燒與火焰滅菌:灼燒主要是用于接種工具滅菌,在火焰上灼燒即可達到徹底滅菌,火焰滅菌通常用于無(wú)菌操作中,將試管口、玻璃瓶口、硅氟塑料塞等反復通過(guò)火焰數次,利用火焰對管口等進(jìn)行滅菌,阻止管口污染,作為無(wú)菌操作過(guò)程中的輔助滅菌手段。
1.2干烤滅菌:利用熱輻射及干熱空氣進(jìn)行滅菌。一般將待檢滅菌的物品如金屬、玻璃、陶瓷制品包裝后,均可在烤箱內干熱滅菌。
通常加熱至160℃,保溫2h可完全滅菌。但不宜超過(guò)170℃,玻璃量具易變形。
降溫過(guò)速,驟冷易引起玻璃器皿炸裂。干熱滅菌時(shí)裝入干烤箱內的物品切勿緊密,應有空隙,利于熱空氣流動(dòng),過(guò)密,致使溫度不均,部分物品滅菌不徹底。
2.濕熱滅菌法通過(guò)加壓提高蒸汽溫度,用高壓蒸汽滅菌,穿透力強,溫度高,滅菌效果最好。注意事項:1.完全排除高壓滅菌器內的冷空氣。
有冷空氣存在時(shí),在同一表壓下所達到的溫度值要低,而冷空氣排出越少,溫度就低得越多。在高壓蒸汽滅菌時(shí),為保證達到規定的溫度,必須將冷空氣完全排除。
否則,雖然壓力達到,而溫度達不到規定的要求,滅菌就不徹底。3.紫外線(xiàn) 殺菌譜廣,但穿透力弱,影響因素多,殺菌效能受到一定限制。
紫外線(xiàn)消毒效果與紫外線(xiàn)強度、照射時(shí)間、溫度與濕度等因素有關(guān)。我國規定紫外燈照射強度距離1m處不低于70μw/cm2。
一般紫外燈使用超過(guò)100h,則應更換。表面有塵土,降低滅菌效果。
紫外燈殺菌的溫度以20~40℃,相對濕度40%~60%為宜。
消毒 具有殺死致病微生物的作用或方法,稱(chēng)為消毒。
滅菌 指徹底殺菌,即用物理或化學(xué)等方法,殺死物體上的一切微生物,以及它們的芽胞和孢子,使物體成為無(wú)菌狀態(tài)。常用消毒和滅菌方法 (一)物理滅菌方法 通過(guò)高潮、射線(xiàn)、微波以及器械進(jìn)行滅菌或除菌的方法均為物理滅菌方法。
1、熱力滅菌 利用高潮殺死微生物的方法,稱(chēng)為熱力滅菌。熱力滅菌經(jīng)常使用兩個(gè)殺菌指數:熱死溫度和熱死速度。
熱力滅菌經(jīng)濟有效,簡(jiǎn)便易行,是最普遍采用的方法,它可以分為濕熱滅菌和干熱滅菌兩種。(1)濕熱滅菌 指利用熱蒸汽殺死微生物。
常用濕熱滅菌方法圾如下幾種。A.高壓蒸汽滅菌法 利用高溫高壓蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。
高壓蒸汽滅菌可以殺死一切微生物,包括細菌的芽孢,真菌的孢子或休眠體等耐高溫的個(gè)體。滅菌的蒸汽溫度隨蒸汽壓力增加而升高,增加蒸汽壓力,滅菌的時(shí)間可以大大縮短。
因此它是一種最有效的、使用最廣泛的滅菌方法。使用高壓蒸汽滅菌時(shí),應注意以下幾點(diǎn): a、滅菌鍋內的冷氣必須排盡。
b、滅菌鍋內的培養基必須排列疏松,使蒸汽暢通。 c、滅菌完畢,應緩慢減壓。
d、注意棉塞防濕。B.常壓蒸汽滅菌法 采用自然壓力的蒸汽進(jìn)行滅菌的方法。
利用常壓蒸汽滅菌時(shí),滅菌物品在滅菌鍋內排列不能過(guò)密,要保證蒸汽能在鍋內均勻地流通。流通蒸汽的溫度一般為100℃左右,要殺死耐熱性的芽胞, 必須延長(cháng)滅菌時(shí)間,一般為6-8小時(shí)。
這種專(zhuān)用流通蒸汽滅菌灶的最大優(yōu)點(diǎn)是:容量大, 結構簡(jiǎn)單,成本低廉,可自行建造。缺點(diǎn)是滅菌時(shí)間長(cháng),能源消耗量大,稍不注意就有滅菌不徹底的現象發(fā)生。
C.間歇滅菌法 指間歇一定時(shí)間,連續消毒幾次達到滅菌的方法。此方法運用于不耐高溫的(100℃左右)培養基的滅菌。
欲殺死培養基的芽胞, 可將其在流通蒸汽中消毒20-30分鐘,先殺死其中的營(yíng)養體細胞,然后將培養基在室溫或溫箱中培養,使芽孢發(fā)芽長(cháng)成營(yíng)養體,再用流通蒸汽消毒20-30分鐘,殺死新長(cháng)成的營(yíng)養體細胞,這樣連續3次,即可殺死培養基中的全部芽孢,達到無(wú)菌狀態(tài)。(2)干熱滅菌 采用灼燒或干熱空氣滅菌,稱(chēng)為干熱滅菌。
干熱滅菌主要有兩種類(lèi)型。A.火焰滅菌法 即通過(guò)火焰高溫灼燒進(jìn)行滅菌的方法。
B.干熱滅菌法 即利用加熱的高溫空氣進(jìn)行滅菌的方法。2、輻射滅菌 利用輻射產(chǎn)生的能量進(jìn)行殺菌的方法,稱(chēng)之輻射滅菌。
生產(chǎn)上應用輻射滅菌方法主要是指此外線(xiàn)滅菌。3、過(guò)濾除菌 是利用機械的阻留方法來(lái)除去介質(zhì)中的微生物。
(二)化學(xué)滅菌方法 利用化學(xué)藥品滅菌或創(chuàng )造一個(gè)無(wú)菌環(huán)境,也是非常重要的滅菌手段。許多公演藥品可使菌體蛋白質(zhì)變性,有的可阻礙微生物的某一代謝環(huán)節。
因此,化學(xué)藥品可超到殺菌作用或抑菌作用。直接加入培養基能起滅菌作用,又不影響培養基成分的化學(xué)藥品并不多,根據報道β-丙烷內酯(BPL)和焦碳酸二乙酯(PKE)具有這種作用,但應用甚少。
有的具有殺菌和抑菌作用,但加入培養基后阻礙了香菇菌絲體生長(cháng)發(fā)育,也不能被采用。香菇生產(chǎn)中常用的化學(xué)藥品及具體使用方法如下。
1、甲醛的殺菌機理是具有強還原作用。 2、硫磺及其熏蒸滅菌方法 3、乙醇類(lèi) 乙醇又稱(chēng)為酒精。
70-80%乙醇的殺菌能力較強。 4、酚及其衍生物 常用的是石碳酸,又名苯酚,純品為無(wú)色或白色針狀、塊狀或三棱形晶體,溶于水,具特殊氣味。
濃石碳酸能使皮膚變白、手指麻痹并可損壞皮膚與粘膜,對人畜有毒。0.5-1%的石碳酸水溶液作為噴霧劑處理無(wú)菌室(箱), 能起到降塵除菌、空氣消毒的作用;也可用3-5%的石碳酸水溶液對器械浸泡消毒。
在5%石碳酸水溶液中若加入0.85-0.9%的食鹽則可增加石碳酸藥效,如有乙醇存在時(shí), 則藥效大減。 5、石灰與堿類(lèi) 石灰分為生石灰(CaO)與熟石灰(Ca(OH)2)兩種。
起殺菌作用的是熟石灰中的氫氧根離子,能水解蛋白質(zhì)和核酸,使微生物的酶系和結構受到損害,并能分解菌體中的糖類(lèi)。 6、氧化劑與還原劑 高錳酸鉀、過(guò)氧化氫、鹵素(氯、溴、碘)及某些化合物(或絡(luò )合物),如漂白粉等均為氧化劑,可以殺菌。
亞硫酸及亞硫酸鹽等均為還原劑,能通過(guò)氧化還原反應起到殺菌作用。 7、重金屬類(lèi) 一些重金屬及其化合物,可使微生物的蛋白合成受破壞,亦可導致酶失活及取代細胞結構上的主要元素,使微生物生長(cháng)受掏或導致死亡。
8、表面活性劑 具有降低表面張力的物質(zhì)稱(chēng)為表面活性劑。常用的肥皂與十二烷基磺酸鈉類(lèi)(如洗衣粉)的殺菌能力相當于石碳酸的2-3倍。
9、氣霧消毒盒。
常用的消毒滅菌方法有兩大類(lèi):物理消毒滅菌法和化學(xué)消毒滅菌法。
物理消毒滅菌法是利用物理因素如熱力、輻射、過(guò)濾等清除或殺滅病原微生物的方法;化學(xué)消毒滅菌法是各種化學(xué)消毒劑來(lái)清除或殺滅病原微生物的方法。不能用物理^法消毒的可選用化學(xué)方法,包括高效、中效、低效消毒劑或滅菌劑。
其中物理消毒滅菌法包括如下內容: (1) 熱力消毒滅菌法:①干熱法,包括燃燒法、干烤法;②濕熱法,包括壓力蒸汽滅菌法、煮沸消毒法等; (2) 輻射消毒法:①日光暴曬法;②紫外線(xiàn)消毒法;③臭氧消毒法; (3) 電離輻射滅菌法; (4) 微波消毒法; (5) 機械除菌法。
滅菌是指采用強烈的理化因素使任何物體內外部的一切微生物永遠喪失其生長(cháng)繁殖能力的措施。
滅菌常用的方法有化學(xué)試劑滅菌、射線(xiàn)滅菌、干熱滅菌、濕熱滅菌和過(guò)濾除菌等。滅菌的徹底程度受滅菌時(shí)間與滅菌劑強度的制約。
微生物對滅菌劑的抵抗力取決于原始存在的群體密度、菌種或環(huán)境賦予菌種的抵抗力。滅菌是獲得純培養的必要條件,也是食品工業(yè)和醫藥領(lǐng)域中必需的技術(shù)。
方法的選擇 根據物品污染后導致感染的風(fēng)險高低選擇相應的消毒或滅菌方法: 1)高危險度物品,應采用滅菌的方法處理; 2)中危險度物品,應采用達到中水平消毒以上效果的消毒方法; 3)低危險度物品,宜采用低水平消毒方法,或做清潔處理;遇有病原微生物污染時(shí),針對所污染的病原微生物種類(lèi)選擇有效的消毒方法 根據物品上污染微生物的種類(lèi)、數量選擇消毒或滅菌的方法: 1) 對收到致病菌芽孢、真菌孢子、分枝桿菌和經(jīng)學(xué)傳播病原體污染的物品,應采用高水平消毒或滅菌; 2)對受到真菌、親水病毒、螺旋體、支原體、衣原體等病原微生物污染的物品,應采取中水平以上的消毒方法; 3)對受到一般細菌和親脂病毒等污染的物品,應采用達到中水平或低水平的消毒方法。
1、重復使用的診療器械、器具和物晶?使用后應先清潔。再進(jìn)行消毒或滅菌。
2 、被朊病毒、氣性壞疽及突發(fā)不明原因的傳染病病原體污染的診療器械、器具和物品?應執行本規范第ll章的規定。
3 耐熱、耐濕的手術(shù)器械?應酋選壓力蒸汽滅菌?不應采用化學(xué)消毒劑浸泡滅菌。
4 、環(huán)境與物體表面一般情況下先清潔。再消毒?當受到患者的血液、體液等污染時(shí)?先去除污染物?再清潔與消毒。
5 、醫療機構消毒工作中使用的消毒產(chǎn)品應經(jīng)衛生行政部門(mén)批準或符合相應標準技術(shù)規范?并應遵循批準使用的范圍、方法和注意事項。
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