聚凝胺交叉配血實驗(交叉配血試驗的注意事項)
1.交叉配血試驗的注意事項
待檢紅細胞懸液不宜過稀或過濃；
所用的試劑必須在有效期內(nèi)；
氣溫較高時，為防止標(biāo)本干涸所致的假陽性，可將玻片放入有一濕棉球的平皿中。若室溫過低，可將玻片置于28℃右右的溫箱中；
注意區(qū)分紅細胞的疊連現(xiàn)象與凝集現(xiàn)象。前者滴加生理鹽水1~2滴混勻后，紅細胞即可分散成渾濁狀，而后者則不因此而改變；
利用已知A型和B型紅細胞與一系列稀釋的待檢血清作凝集反應(yīng)，根據(jù)凝集效價（以出現(xiàn)凝集的最高稀釋度）的高低可作為判斷體液免疫功能的一項指標(biāo)。多數(shù)免疫功能正常的半歲嬰兒，除AB型外，血清中相應(yīng)的抗A效價≥1:8，抗B效價≥1:4。一歲后，凝集效價也相應(yīng)提高。
2.聚凝胺交叉配血試驗的注意事項是什么?
聚凝胺交叉配血試驗的注意事項如下： ①可以用EDTA抗凝之血漿代替血清使用； ②若患者血清（血漿）含肝素，如血液透析患者，須多加4-6滴Polyrene溶液以中和肝素； ③若試劑使用前為低溫C存，請恢復(fù)室溫再行操作； ④加做輔助性抗球蛋白試驗，目的是增 加檢測抗-K的敏感性，對檢測其他紅細胞抗體無幫助； ⑤在冬天室溫極低的情況下，操作交 叉配血試驗，某些患者血清中可能含有冷凝集素，可導(dǎo)致假陽性的結(jié)果出現(xiàn)。
若有此懷疑， 建議在最后滴入復(fù)懸液時，將試管立即置入37°C水浴中，輕輕搖動試管混合，并在30秒內(nèi) 觀察結(jié)果； ⑥離心力所對應(yīng)轉(zhuǎn)速為3400rpm。
3.聚凝胺交叉配血試驗的原理是什么?
交叉配血試驗，是指受血者的血清加供血者的紅細胞懸液，供血者的血清加受血者的紅細胞懸液，同時進行凝集試驗。
交叉配血試驗包括主試驗和副試驗兩種。前者用受血者的血清與供血者的紅細胞懸液做試驗，以發(fā)現(xiàn)受血者的血清中是否含有與供血者紅細胞反應(yīng)的抗體，又稱直接配合或主側(cè)配合。
后者則用供血者的血清與受血者紅細胞做試驗，以發(fā)現(xiàn)供血者血清中是否有不合抗體，又稱間接配合。其目的是驗證供者與受者ABO血型鑒定是否正確，以防止溶血性輸血反應(yīng)。
此外，也可檢出ABO血型系統(tǒng)的不規(guī)則凝集素，以及發(fā)現(xiàn)ABO系統(tǒng)以外的其他血型抗體。交叉配血試驗有多種方式，如鹽水法、膠體介質(zhì)配血法、抗球蛋白法、聚凝胺法等。
輸血時，不僅要鑒定ABO血型和Rh血型，即使輸入同型血，或受血者再次接受同一供血者的血液，都必須做交叉配血試驗。
4.聚凝胺配血法操作流程
操作方法：
1、取出3支試管分別標(biāo)記主、次及對照管測試。
主測管：2113 病人血清2滴 + 獻血者3%~5%血球（洗滌不洗滌均可）52611滴，血球用生理鹽水稀釋
次測管： 獻血者血清2滴 + 病人3%~5%血球（洗滌不洗滌均可）1滴，血球用生理鹽水稀釋
對照管： 2滴陽性對照血清 + 獻血者3%~5%血球（洗滌不洗滌均可）1滴，血球用生理鹽水稀釋
2、各加低離子介溶液0.65ml， 輕輕混合均勻，于室溫下，靜置1分鐘
3、滴加2滴凝聚胺溶液，輕輕混合均勻，于室溫下靜置15秒鐘
4、離心，3400轉(zhuǎn)/10秒鐘，然后把上清夜倒掉，不要倒干，使管底保留大4102約0.1ml的液體
5、測紅血球有無變成1653凝塊（即凝集反應(yīng)），如果沒有凝塊，則版必須重做。權(quán)重做后，仍然沒有凝集現(xiàn)象出現(xiàn)，可能試劑失效，請與代理商或原廠商聯(lián)系
6、加入2滴復(fù)懸液，并輕輕混合，觀察結(jié)果。若為凝聚胺引起的非免疫性凝集，應(yīng)該在1分鐘內(nèi)散開；若異體抗體所引起的免疫性凝集，則不會散開
7、倒在玻片上用肉眼或顯微鏡觀察有無凝集，如有凝集反應(yīng)，表示不合，此獻血者的血液不宜給病人使用；如無凝集反應(yīng)，表示獻血者的血液適合給病人輸注。
實驗完畢后將聚凝胺試劑放回冰箱內(nèi)。
5.影響聚凝胺交叉配血的因素有哪些
⑴可以用含EDTA之血漿代替血清使用。
⑵若病人血清（血漿）含肝素，如洗腎患者，須多加4—6滴Polyrene溶液以中和肝素。⑶若試劑使用前為低溫貯存，請恢復(fù)室溫再行操作。
⑷加做輔助性抗球蛋白試驗，目的是增加檢測抗-K的敏感性，對檢測其他紅細胞抗體無幫助。 ⑸在冬天室溫極低的情況下，操作交叉配血試驗，某些病人血清中可能含有寒冷凝集素等因素，可導(dǎo)致假陽性的結(jié)果出現(xiàn)。
若有此懷疑，建議在最后滴入Resuspending時，將試管立即置入37℃水浴中，輕輕搖動試管混合，并在30秒內(nèi)觀察結(jié)果。 ⑹離心力所對應(yīng)轉(zhuǎn)速為3400rpm.。
6.交叉配血時受血者血標(biāo)本采集時注意事項有哪些
輸血前1、輸血前當(dāng)晚要有充足的睡眠，精神狀態(tài)良好； 2、輸血前一天和當(dāng)天2113早晨，不要吃油膩食物； 3、不要空腹輸血，應(yīng)當(dāng)吃些清淡的食物，如稀飯、饅頭、面包等。
4，思想上有放松，不要對輸血覺得有5261負擔(dān)。獻血后：1、拔針后前臂伸直后稍上抬，用三個手指用力按壓針眼10分鐘以上，不要揉搓針，24小時內(nèi)勿清洗針眼；2、輸血后1-2天應(yīng)適當(dāng)4102休息，勿熬夜或進行劇烈運動，如踢足球、打籃球、跑步或駕車及高空作業(yè)等；3、少部分人抽1653血后有可能出現(xiàn)疲倦感、嗜睡，這大多是第一次丑血出現(xiàn)的生理反應(yīng)現(xiàn)象，不必擔(dān)心，適當(dāng)休息可自行恢復(fù)； 4、輸血后一兩天內(nèi)勿暴食暴飲，勿喝酒。
內(nèi)在平常飲食的基礎(chǔ)上可適當(dāng)補充些蛋白質(zhì)和水果。5、若針眼處有青紫現(xiàn)象，這是由于當(dāng)時止血不好或是血管少量滲血所致，幾天內(nèi)會自行吸收，不會留下痕跡；若青紫面較大，可在獻血二十四小時后熱敷容即可消除。
6、輸血后注意不要著涼，避免感冒。
7.交叉配血的試驗是怎樣的
材料和試劑 診斷用人血型抗A血清、診斷用人血型抗B血清（常在血清中加入不同顏色的染料以示區(qū)別，如A型紅色，B型藍色）、生理鹽水、供血者血清、受血者血清、供血者的2%紅細胞懸液、受血者的2%紅細胞懸液。
器具 凹玻片或載玻片、小試管、尖嘴滴管、無菌刺血針、牙簽、酒精棉球、無菌干棉球、試管架、顯微鏡、記號筆等。 操作過程交叉配血1、首先準(zhǔn)備好受血者和獻血者的血樣。
2、分別用生理鹽水配好用受血者2·5%的紅細胞鹽水懸液、獻血者2·5%紅細胞鹽水懸液。 3、主側(cè)加受血者血清0。
5ml，獻血者紅細胞鹽水懸液0。5ml。
4、次側(cè)加獻血者血清0。5ml，受血者紅細胞鹽水懸液0。
5ml。 5、混勻后，根據(jù)所用交叉配血方式，如酶技術(shù)配血法，可在37度水浴箱孵育1小時后，直接觀察有無凝集或溶血；若選用鹽水介質(zhì)等方法，則需1000rpm離心1min；或選用一定的速度離心相應(yīng)的時間，如聚凝胺試劑提供的轉(zhuǎn)速和時間。
結(jié)果觀察 先觀察上清液的顏色，然后再輕搖試管觀察有無紅細胞凝集現(xiàn)象發(fā)生； 結(jié)果判定：如試管內(nèi)紅細胞呈均勻混濁無顆粒出現(xiàn)即無凝集，上清液呈正常血清狀顏色為交叉配血試驗相合。如上清液呈紅色即有溶血現(xiàn)象，紅細胞成塊即為凝集現(xiàn)象，為交叉配血試驗不相合。
