細菌檢測(微生物檢驗基礎是什么)
1.微生物檢驗基礎是什么
如下： （1） 微生物的種類(lèi)微生物是指存在于自然界中一類(lèi)形體微 小、結構簡(jiǎn)單、繁殖快、分布廣、種類(lèi)多、數量大、肉眼看不見(jiàn)，必須 借助光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡放大后才能看到的微小生物。
包括： ① 非細胞型微生物這類(lèi)微生物體積最小，不具備細胞結構， 必須在活的細胞內才能增殖。 病毒屬于此類(lèi)，需用電鏡觀(guān)察。
② 原核細胞型微生物僅有核質(zhì)，無(wú)核膜和核仁，缺乏完整的 細胞器。這類(lèi)微生物有細菌、放線(xiàn)菌、螺旋體、支原體、立克次氏體 和衣原體。
需用油鏡觀(guān)察。 ③ 真核細胞型微生物細胞核的分化程度較高，有核膜、核仁 和染色體，胞質(zhì)內有完整的細胞器。
真菌屬于此類(lèi)。可用肉眼或 低、高倍顯微鏡觀(guān)察。
（2） 細菌的形態(tài)和結構細菌是一類(lèi)具有細胞壁的單細胞原 核微生物。細菌的個(gè)體微小，必須用顯微鏡放大才能看到。
細菌 的大小，以微米（ym）表示。 ① 細菌的形態(tài)根據細菌外形的不同，可將細菌的形態(tài)分為 3種主要類(lèi)型：球狀、桿狀和螺旋狀；并據此將細菌分為球菌、桿菌 和螺旋狀菌。
a。 球菌呈球形或類(lèi)球形。
根據其分裂后的排列情況，分為 單球菌、雙球菌（兩個(gè)成對）、四聯(lián)球菌、八疊球菌、葡萄球菌、鏈球菌。 b。
桿菌桿菌一般呈正圓柱形，也有的近似卵圓形。菌體 兩端多為鈍圓，少數是平截，如炭疽桿菌。
有些桿菌的菌體短小，近似球狀，稱(chēng)為球桿菌，如多殺性巴氏桿菌。 有些桿菌 會(huì )形成側支或分枝，稱(chēng)為分枝桿菌。
有的桿菌呈長(cháng)絲狀，如壞死 梭桿菌。 c。
螺旋菌螺旋菌菌體呈彎曲狀，根據菌體彎曲情況的不同， 可分為弧菌和螺菌 。
2.細菌學(xué)檢驗基本技術(shù)有哪些
1.涂片鏡檢
將病料涂于清潔無(wú)油污的載玻片上，干燥后在酒精燈火焰上固 定，選用單染色法（如美藍染色法）、革蘭氏染色法、抗酸染色法或其他特殊染色法染色鏡檢，根據所觀(guān)察到的細 菌形態(tài)特征，作出初步診斷或確定進(jìn)一步檢驗的步驟。
2.分離培養
根據所懷疑傳染病病原菌的特點(diǎn)，將病料接種于適宜的細菌培 養基上，在一定溫度（常為37°C）下進(jìn)行培養，獲得純 培養苗后，再用特殊的培養基培養，進(jìn)行細菌的形態(tài)學(xué)、培養特 征、生化特性、致病力和抗原特性鑒定。
3.動(dòng)物實(shí)驗
用滅菌生理鹽水將病料做成1 : 10懸液，或利用分離培養獲得的細菌液感染實(shí)驗動(dòng)物，如小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔等。感染方法可用皮下、肌內、腹腔、靜脈或腦內注射。感染后按常規隔離 伺養管理，注意觀(guān)察，有時(shí)還需對某種實(shí)驗動(dòng)物測量體溫；如有死亡，應立即進(jìn)行剖檢及細菌學(xué)檢查。
3.如何快速掌握臨床微生物檢驗基礎知識
① 研究感染性疾病的病原學(xué)特征；② 提供快速、準確的病
原學(xué)診斷；③ 指導合理應用抗生素；④ 監控醫院感染。
微生物學(xué)檢驗的基本任務(wù)：
① 研究標本采集、運送和保存的方法，以及標本的處理方法對提高檢出率的關(guān)系。
② 各種感染性疾病的病原體的檢測方法，最佳方法的選擇、各種病原微生物的鑒定程序以及雙歧鑒定流程、質(zhì)量控制。
③ 各種病原微生物的快速診斷法、自動(dòng)化儀器和微量化裝制的使用。
④ 執行國際標準操作程序和方法做好抗菌藥物敏感試驗。
⑤結果分析、實(shí)驗方法的評價(jià)及臨床意義。
4.如何快速掌握臨床微生物檢驗基礎知識
① 研究感染性疾病的病原學(xué)特征；② 提供快速、準確的病 原學(xué)診斷；③ 指導合理應用抗生素；④ 監控醫院感染。
微生物學(xué)檢驗的基本任務(wù)： ① 研究標本采集、運送和保存的方法，以及標本的處理方法對提高檢出率的關(guān)系。 ② 各種感染性疾病的病原體的檢測方法，最佳方法的選擇、各種病原微生物的鑒定程序以及雙歧鑒定流程、質(zhì)量控制。
③ 各種病原微生物的快速診斷法、自動(dòng)化儀器和微量化裝制的使用。 ④ 執行國際標準操作程序和方法做好抗菌藥物敏感試驗。
⑤結果分析、實(shí)驗方法的評價(jià)及臨床意義。
5.微生物檢測技術(shù)的內容簡(jiǎn)介
第一模塊 微生物檢驗基礎 項目一 微生物及微生物檢驗概述 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、什么是微生物 二、微生物的特點(diǎn) 三、微生物對產(chǎn)品的污染 四、污染的預防與控制 五、微生物檢驗的任務(wù)和意義 六、微生物檢驗的對象 七、微生物檢驗的質(zhì)量管理 八、微生物檢驗的發(fā)展趨勢 【思考題】 閱讀小知識：微生物的命名及分類(lèi) 項目二 微生物的形態(tài)結構 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、細菌 二、放線(xiàn)菌 三、酵母菌 四、霉菌 五、病毒 【思考題】 閱讀小知識：小布商成了英國皇家學(xué)會(huì )的會(huì )員 微生物的奠基人——巴斯德 項目三 微生物的生理特性 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、微生物的營(yíng)養 二、微生物的生長(cháng) 三、微生物的代謝 【思考題】 閱讀小知識：抗生素的濫用及食品安全 第二模塊 微生物檢驗常規技術(shù) 微生物實(shí)驗室守則 實(shí)驗室的急救 項目四 微生物培養基的配制 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、培養基的分類(lèi) 二、選用或設計培養基的基本原則 任務(wù)4 1配制常用的微生物培養基 【思考題】 項目五 消毒滅菌技術(shù) 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、消毒滅菌的有關(guān)概念 二、消毒滅菌的方法 任務(wù)5 1干熱滅菌技術(shù)及玻璃器皿的滅菌 【思考題】 任務(wù)5 2高壓蒸汽滅菌技術(shù)及培養基的滅菌 【思考題】 任務(wù)5 3無(wú)菌室的消毒處理及超凈臺的使用 【思考題】 任務(wù)5 4液體過(guò)濾除菌 【思考題】 項目六 微生物的分離、純化、培養技術(shù) 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、接種技術(shù) 二、分離純化技術(shù) 任務(wù)6 1微生物的接種 【思考題】 任務(wù)6 2微生物純種的分離培養及菌落 特征觀(guān)察 【思考題】 項目七 微生物染色及顯微形態(tài)觀(guān)察技術(shù) 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、顯微技術(shù) 二、染色技術(shù) 任務(wù)7 1普通光學(xué)顯微鏡的使用 【思考題】 任務(wù)7 2細菌的染色及形態(tài)結構觀(guān)察 【思考題】 任務(wù)7 3酵母菌、霉菌的染色及形態(tài)結構 觀(guān)察 【思考題】 閱讀小知識：顯微鏡 項目八 微生物的計數技術(shù) 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、細胞數量的測定 二、細胞生物量的測定 任務(wù)8 1顯微鏡直接計數 【思考題】 任務(wù)8 2平板菌落計數 【思考題】 項目九 菌種保藏技術(shù) 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、菌種保藏的基本原理 二、菌種保藏方法 任務(wù)9 1實(shí)驗室常用簡(jiǎn)易菌種保藏法 【思考題】 任務(wù)9 2菌種的冷凍真空干燥保藏法 【思考題】 任務(wù)9 3菌種的液氮超低溫保藏法 【思考題】 項目十 血清學(xué)檢驗技術(shù) 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、抗原、抗體及血清學(xué)反應 二、血清學(xué)反應的特點(diǎn)及影響因素 三、血清學(xué)反應的基本類(lèi)型 閱讀小知識：?jiǎn)慰寺】贵w及 生物導彈 第三模塊 產(chǎn)品中的微生物檢驗綜合實(shí)訓 項目十一 微生物檢驗工作流程與質(zhì)量控制 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、微生物檢驗工作流程 二、微生物檢測的質(zhì)量控制 任務(wù)11 1對某一檢測結果的分析和報告 的撰寫(xiě) 【思考題】 項目十二 食品的微生物學(xué)檢驗 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、概述 二、食品檢樣的采集與制備 三、食品檢樣的保存及送檢 四、食品衛生微生物學(xué)檢驗技術(shù) 五、食品中致病菌的檢測技術(shù) 六、食品中霉菌和酵母菌的檢驗技術(shù) 七、微生物快速檢測技術(shù) 任務(wù)12 1食品中細菌總數和大腸菌群的檢測 【思考題】 任務(wù)12 2罐頭食品商業(yè)無(wú)菌的檢測 【思考題】 任務(wù)12 3酸乳中乳酸菌的檢測 【思考題】 任務(wù)12 4食品中糞大腸菌群的檢測 【思考題】 任務(wù)12 5紙片法快速檢測食品中金黃色 葡萄球菌 【思考題】 項目十三 化妝品的微生物學(xué)檢驗 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、概述 二、化妝品的衛生學(xué)檢驗標準 三、化妝品的采集與預處理 四、化妝品的衛生細菌檢驗 任務(wù)13 1化妝品中綠膿桿菌的檢測 【思考題】 項目十四 藥品的微生物學(xué)檢驗 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、藥品無(wú)菌檢查法 二、微生物限度檢查法 任務(wù)14 10?9%氯化鈉注射劑的無(wú)菌 檢驗 【思考題】 任務(wù)14 2咳嗽糖漿中細菌總數、霉菌及 酵母菌總數的測定 【思考題】 項目十五 環(huán)境的微生物學(xué)檢測 【知識目標】 【能力目標】 【背景知識】 一、空氣潔凈度的微生物檢測 二、水質(zhì)的微生物學(xué)檢驗 三、活性污泥中微生物生物量的測定 任務(wù)15 1生活飲用水中細菌總數和總 大腸菌群的檢測 【思考題】 任務(wù)15 2發(fā)酵車(chē)間空氣中微生物的 測定 【思考題】 任務(wù)15 3活性污泥生物相的觀(guān)察 【思考題】 附錄 附錄1 微生物實(shí)驗室常用玻璃器皿及 洗滌 附錄2 實(shí)驗室常用培養基的配制 附錄3 實(shí)驗室常用染色液的配制 附錄4 食品生產(chǎn)相關(guān)產(chǎn)品的國家衛生 標準 附錄5 《中華人民共和國藥典》（2005年版） （二部）微生物限度標準 附錄6 化妝品衛生標準（GB7916-87） 參考文獻 隨著(zhù)經(jīng)濟的高速發(fā)展和加入WTO，我國已全面走向世界經(jīng)濟大舞臺，國際、國內貿易迅猛發(fā)展，商品貿易快速增加。
在產(chǎn)品的生產(chǎn)企業(yè)、流通領(lǐng)域及質(zhì)量技術(shù)監督管理部門(mén)，迫切需要從事產(chǎn)品質(zhì)量控制、商品質(zhì)量檢驗、質(zhì)量技術(shù)監督與管理等方面的專(zhuān)業(yè)人才，高職高專(zhuān)商品質(zhì)量檢驗專(zhuān)業(yè)正是為適應這一新。
6.衛生和微生物學(xué)基礎知識
請在此輸質(zhì)量中心微生物檢驗員統一考試題答案部門(mén)： 姓名： 得分：一、填空題：（50分，每空1分）1、無(wú)菌生理鹽水滅菌條件為（121）℃高壓滅菌（15）分鐘。
2、牛奶菌落總數檢測方法中，待瓊脂凝固后，將平板翻轉，（36±1）℃培養（48±2）小時(shí)。3、根據對樣品污染狀況的估計，選擇2個(gè)-3個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液，液體樣品可包括原液，在進(jìn)行10倍遞增稀釋時(shí)，每個(gè)稀釋度分別吸取（1ml）樣品勻液加入兩個(gè)無(wú)菌平皿內。
4、大腸菌群是指一群在（36）℃條件下培養48小時(shí)，能（發(fā)酵乳糖），（產(chǎn)酸產(chǎn)氣）的需氧和兼性厭氧革（蘭氏陰性無(wú)芽胞桿菌）。大腸菌的MPN是指（基于泊松分布）的一種間接方法。
5、大腸菌群的證實(shí)試驗中，凡（BGLB肉湯管產(chǎn)氣），即可報告為大腸菌群陽(yáng)性。6、糞大腸桿菌主要包括（大腸埃希氏菌），也包括少量的（克雷伯氏菌）。
7. 膽鹽可抑制（革蘭氏陽(yáng)性菌），湟綠是（抑菌抗腐劑），可增強隊革蘭氏陽(yáng)性菌的抑制作用。8.大腸桿菌平板計數選擇菌落數為（10—100）的平板，暗室中（360nm—366nm）波長(cháng)紫外燈照射下，計數平板上發(fā)（淺藍色）熒光的菌落。
7、夾膜對于細菌來(lái)說(shuō)的功能是起（保護）作用，鞭毛的功能是（借助鞭毛的轉動(dòng)而運動(dòng)）。8、金黃色葡萄球菌在Baird-Parker 平板上，菌落直徑為（2mm—3mm），顏色呈（灰色到褐色），邊緣為（淡色），周?chē)鸀橐唬ɑ鞚釒В谄渫鈱佑幸唬ㄍ该魅Γ?/p>
一般認為（血漿凝固陽(yáng)性）的金黃色葡萄球菌菌株有致病力。9、甲基紅試驗方法，取適量瓊脂培養物接種于緩沖葡萄糖蛋白胨水，36℃±1℃培養2d—5d。
滴加甲基紅一滴，立即觀(guān)察節ugo。（鮮紅色）為陽(yáng)性，（黃色）為陰性。
10、沙門(mén)氏菌生化試驗中，自選擇性瓊脂平板上挑取 兩個(gè)以上典型或可疑菌落，分別接種（三糖鐵瓊脂）、（賴(lài)氨酸 脫羧酶試驗培養基）、（營(yíng)養瓊脂平板）。11、用于微生物染色的染色劑主要有三種：（酸性染色劑）（堿性染色劑）（復合染色劑）。
12、影響微生物生長(cháng)的物理因素（ 溫度）、（ 輻射）、（超聲波 ）、（過(guò)濾 ）、（滲透壓）等。13、假單胞桿菌主要污染源為（水源）、（再污染）。
14、藥品按純度分為（優(yōu)級純）（分析純）（化學(xué)純）（實(shí)驗試劑）（生物試劑）。15、嗜冷菌計數培養基的保質(zhì)期是（三年）。
16、微生物的分類(lèi)依據主要是（形態(tài)特征）、培養特征、（生理特征）及（血清反應）等。二、選擇題（30分，每題2分）1、球菌可分為（ ABCDE ）。
A、微球菌 B、八迭菌 C、雙球菌 D四聯(lián)球菌 E、鏈球菌2、分解蛋白的菌包括：（ABD）A、蠟樣芽孢桿菌 B、枯草桿菌 C、大腸桿菌 D微球菌3、酸敗乳和初乳PH一般在（C）以下，A.(6.2以下) B.(6.3以下) C.(6.4以下) D.(6.5以下)4、液體奶壞包產(chǎn)品中微生物可能有那些（ A ）A、革蘭氏陰性桿菌B、乳酸桿菌 C、放線(xiàn)菌D、乳酸鏈球菌5、細菌個(gè)體的基本形態(tài)分別為（ AC ）A、球菌 桿菌 B、雙球菌 螺旋菌C、弧菌 螺旋菌 D、桿菌 單球菌6、對細菌進(jìn)行革蘭氏染色，革蘭氏陽(yáng)性菌為（ A ）色。A.紫 B.藍 C.紅 D.無(wú)7、下列不屬于乳品中沙門(mén)氏菌可疑菌落特征的是（ A ）。
A.無(wú)色透明或透明，干燥B.光滑，中間突起C.邊緣整齊，直徑2~3mmD.有的菌落中央有黑色硫化鐵沉淀8、菌株復壯的常用方法不包括（ D）。A.分離純化 B.寄主復壯 C.雜交育種 D.基因自發(fā)突變9、下列關(guān)于乳脂類(lèi)的物理化學(xué)性質(zhì)說(shuō)法不正確的是（B）A、乳中的脂類(lèi)是指脂肪和類(lèi)脂兩類(lèi)化合物B、脂類(lèi)不溶于水，而溶于乙醚、丙酮、苯等無(wú)機溶劑中C、乳脂肪具有補充消耗了的脂肪和構成脂肪組織的作用D、乳中的類(lèi)脂主要有磷脂、膽固醇等10、細菌性食物中毒中下列哪些菌是主要引起神經(jīng)癥狀（D）A、福氏志賀氏菌B、副溶血弧菌C、葡萄球菌D、肉毒桿菌11、下列屬于乳品中志賀氏菌屬陰性反應的是（ ABCD ）。
A.VP試驗 B.葡萄糖銨試驗 C.苯丙氨酸脫氨酶 D.西蒙氏檸檬酸鹽12、對乳品中的溶血性鏈球菌進(jìn)行染色鏡檢，其菌體特征為（ ABCD ）A.革蘭氏陽(yáng)性球菌 B.排列呈長(cháng)短不等鏈條狀 C.無(wú)芽孢，無(wú)鞭毛 D.不能運動(dòng)13、關(guān)于我國GB6914生鮮牛乳收購標準的規定說(shuō)法不正確的是（ AD ）。A.原料乳中的滴滴涕≤0.5mg/kgB.雜質(zhì)度≤4.0mg/kgC.每毫升Ⅰ級生乳中細菌總數不得超過(guò)50萬(wàn)個(gè)D.每毫升Ⅱ級生乳中細菌總數不得超過(guò)200萬(wàn)個(gè)14、常用測定酸乳發(fā)酵劑乳酸菌活力的方法包括（ AB ）。
A.刃天青還原試驗 B.酸度測定 C.過(guò)氧化氫酶試驗 D.磷酸酶試驗15、影響細菌染色的因素有（ ABCD ）。A.細菌細胞壁、細胞膜的通透性 B.膜孔的大小 C.菌齡 D.染色液中電解質(zhì)含量三、判斷對錯（10分，每題2分）1、平板計數瓊脂的主要成分包括水、胰蛋白胨、酵母浸膏、葡萄糖、瓊脂。
（對）2、國標法檢測菌落總數的報告中，若空白對照上有菌落生長(cháng)，則此次檢測結果無(wú)效。（對）3、EC肉湯管在接種前要預熱到37℃，因為這個(gè)溫度是選擇性生長(cháng)條件之一。
（錯，正確是45℃）4、細菌屬于原核細胞型的微生物（錯）。5、芽胞與細菌有關(guān)的特性是耐熱性。
（對）四、名詞解釋及簡(jiǎn)答題（10分）1、菌落總數（GT/T4789.2-2008）：食品檢樣經(jīng)。
7.細菌學(xué)檢驗基本技術(shù)有哪些
1.涂片鏡檢
將病料涂于清潔無(wú)油污的載玻片上，干燥后在酒精燈火焰上固 定，選用單染色法（如美藍染色法）、革蘭氏染色法、抗酸染色法或其他特殊染色法染色鏡檢，根據所觀(guān)察到的細 菌形態(tài)特征，作出初步診斷或確定進(jìn)一步檢驗的步驟。
2.分離培養
根據所懷疑傳染病病原菌的特點(diǎn)，將病料接種于適宜的細菌培 養基上，在一定溫度（常為37°C）下進(jìn)行培養，獲得純 培養苗后，再用特殊的培養基培養，進(jìn)行細菌的形態(tài)學(xué)、培養特 征、生化特性、致病力和抗原特性鑒定。
3.動(dòng)物實(shí)驗
用滅菌生理鹽水將病料做成1 : 10懸液，或利用分離培養獲得的細菌液感染實(shí)驗動(dòng)物，如小白鼠、大白鼠、豚鼠、家兔等。感染方法可用皮下、肌內、腹腔、靜脈或腦內注射。感染后按常規隔離 伺養管理，注意觀(guān)察，有時(shí)還需對某種實(shí)驗動(dòng)物測量體溫；如有死亡，應立即進(jìn)行剖檢及細菌學(xué)檢查。
