細胞培養瓶(細胞培養的注意事項是什么?)
1.細胞培養的注意事項是什么?
原代動(dòng)物細胞培養：
1、實(shí)驗材料要新鮮，從活體分離材料后要低溫保存，并盡快進(jìn)行細胞分離實(shí)驗。
2、無(wú)菌操作。操作時(shí)用的培養液，可加平時(shí)細胞培養液5倍含量的青鏈霉素。
3、用酶法分離細胞時(shí)，注意酶液的濃度和控制消化時(shí)間。
貼塊法分離細胞時(shí)，注意動(dòng)作要輕柔，不要傷到細胞組織，組織塊邊緣盡量平整有利于細胞游離。
4、培養液的選擇。不同的細胞有對培養液中營(yíng)養的要求不同，根據所分離細胞的特性選擇。
傳代細胞培養：
1、無(wú)菌操作
2、控制消化時(shí)間
3、及時(shí)關(guān)注細胞生長(cháng)狀態(tài)
2.細胞培養過(guò)程應該注意什么問(wèn)題補充:可是很難保證完全無(wú)菌,很容易
細胞培養過(guò)程中的注意事項 ⑴溫度 溫度過(guò)低時(shí)細胞生長(cháng)緩慢甚至不生長(cháng)。
利用冷凍保藏細胞可保持細胞的原有分裂分化能力。溫度過(guò)高導致細胞死亡。
這主要是由酶和蛋白質(zhì)所需要的最適溫度決定的。多數生物大分子遇到高溫后容易導致空間結構改變或者喪失（變性）。
細胞膜遇到高溫后容易變態(tài)。在自然界，既有耐高溫的恒溫培養箱細胞，也有耐低溫的細胞。
在極端情況下生長(cháng)的生物對付極端環(huán)境的機制研究在生物進(jìn)化和農業(yè)、環(huán)保、發(fā)酵工業(yè)中意義重大。 ⑵pH 過(guò)酸或過(guò)堿可導致細胞死亡。
這主要與蛋白質(zhì)的變性和細胞膜的結構受損有關(guān)。 ⑶滲透壓 細胞內外可溶于水的物質(zhì)比例和種類(lèi)決定細胞的膨脹與收縮程度，因為細胞膜是半透膜，只允許對自己有利的物質(zhì)通過(guò)。
同一物質(zhì)在細胞內外的分布的數量不同，當某一種極溶于水的物質(zhì)在細胞外濃度過(guò)大時(shí)，有可能導致細胞干癟死亡，這些物質(zhì)在細胞內過(guò)多時(shí)導致細胞過(guò)量吸水膨脹。 細胞膜調節滲透壓的能力是有限的。
⑷營(yíng)養物 營(yíng)養物和水一起，又叫細胞培養液，培養液中含有細胞增殖和生長(cháng)所需要的各種物質(zhì)。營(yíng)養物包括：N 源、C源，這些物質(zhì)與提供能量有關(guān)；無(wú)機鹽、維生素、激素，這些物質(zhì)與代謝調節控制有關(guān)。
細胞培養液的設計一直是細胞離體培養技術(shù)的關(guān)鍵。理想的細胞培養液可以同時(shí)解決細胞離體培養所需要的pH、滲透壓、營(yíng)養物、調節物質(zhì)的全部需要。
在干細胞分化研究與應用中，關(guān)鍵是找到一種使干細胞分化成為所需細胞和組織的營(yíng)養液。相同的人干細胞，放在不同的營(yíng)養液中分化培養出人的各種臟器，這個(gè)昔日的夢(mèng)想已經(jīng)開(kāi)始成為現實(shí)。
植物細胞的組織培養技術(shù)已經(jīng)基本完善配套。名貴花卉、中草藥、脫毒馬鈴薯、組織培養蓮菜苗等植物細胞與組織培養技術(shù)的不斷完善，特別是由于組織培養液的商品化已經(jīng)被廣大農民普遍接受。
⑸水 水是細胞需要數量最大的物質(zhì)，不同的物種、不同部位、不同生長(cháng)期的細胞含水量差別相當大。 干旱植物細胞的含水量高達90%。
水的需求量一般隨同細胞培養液一起考慮。 ⑹無(wú)菌條件 體外細胞培養僅僅是對所需的細胞進(jìn)行培養，但環(huán)境中（如空氣）有各種其他微生物，必須對所需細胞進(jìn)行無(wú)雜菌的隔離培養。
無(wú)菌條件是細胞離體培養最基本的條件。 ⑺光 植物細胞和少數細菌需要利用光進(jìn)行光合作用。
⑻氣體 動(dòng)物細胞需要不斷供給氧氣和排除二氧化碳，植物細胞與此相反。 二氧化碳的作用：調節pH，有緩沖作用，沒(méi)有刺激動(dòng)物細胞呼吸的功能對不起，我記得也不是很清楚。
我只記得培養皿要消毒，然后培養過(guò)程中要加入抗生素（抑制細菌生長(cháng)），希望能幫到你···。
3.細胞培養過(guò)程應該注意什么問(wèn)題
細胞培養過(guò)程中的注意事項
⑴溫度
溫度過(guò)低時(shí)細胞生長(cháng)緩慢甚至不生長(cháng)。利用冷凍保藏細胞可保持細胞的原有分裂分化能力。溫度過(guò)高導致細胞死亡。這主要是由酶和蛋白質(zhì)所需要的最適溫度決定的。多數生物大分子遇到高溫后容易導致空間結構改變或者喪失（變性）。細胞膜遇到高溫后容易變態(tài)。在自然界，既有耐高溫的恒溫培養箱細胞，也有耐低溫的細胞。在極端情況下生長(cháng)的生物對付極端環(huán)境的機制研究在生物進(jìn)化和農業(yè)、環(huán)保、發(fā)酵工業(yè)中意義重大。
⑵pH
過(guò)酸或過(guò)堿可導致細胞死亡。這主要與蛋白質(zhì)的變性和細胞膜的結構受損有關(guān)。
⑶滲透壓
細胞內外可溶于水的物質(zhì)比例和種類(lèi)決定細胞的膨脹與收縮程度，因為細胞膜是半透膜，只允許對自己有利的物質(zhì)通過(guò)。同一物質(zhì)在細胞內外的分布的數量不同，當某一種極溶于水的物質(zhì)在細胞外濃度過(guò)大時(shí)，有可能導致細胞干癟死亡，這些物質(zhì)在細胞內過(guò)多時(shí)導致細胞過(guò)量吸水膨脹。細胞膜調節滲透壓的能力是有限的。
⑷營(yíng)養物
營(yíng)養物和水一起，又叫細胞培養液，培養液中含有細胞增殖和生長(cháng)所需要的各種物質(zhì)。營(yíng)養物包括：N 源、C源，這些物質(zhì)與提供能量有關(guān)；無(wú)機鹽、維生素、激素，這些物質(zhì)與代謝調節控制有關(guān)。細胞培養液的設計一直是細胞離體培養技術(shù)的關(guān)鍵。理想的細胞培養液可以同時(shí)解決細胞離體培養所需要的pH、滲透壓、營(yíng)養物、調節物質(zhì)的全部需要。在干細胞分化研究與應用中，關(guān)鍵是找到一種使干細胞分化成為所需細胞和組織的營(yíng)養液。相同的人干細胞，放在不同的營(yíng)養液中分化培養出人的各種臟器，這個(gè)昔日的夢(mèng)想已經(jīng)開(kāi)始成為現實(shí)。植物細胞的組織培養技術(shù)已經(jīng)基本完善配套。名貴花卉、中草藥、脫毒馬鈴薯、組織培養蓮菜苗等植物細胞與組織培養技術(shù)的不斷完善，特別是由于組織培養液的商品化已經(jīng)被廣大農民普遍接受。
⑸水
水是細胞需要數量最大的物質(zhì)，不同的物種、不同部位、不同生長(cháng)期的細胞含水量差別相當大。干旱植物細胞的含水量高達90%。水的需求量一般隨同細胞培養液一起考慮。
⑹無(wú)菌條件
體外細胞培養僅僅是對所需的細胞進(jìn)行培養，但環(huán)境中（如空氣）有各種其他微生物，必須對所需細胞進(jìn)行無(wú)雜菌的隔離培養。無(wú)菌條件是細胞離體培養最基本的條件。
⑺光
植物細胞和少數細菌需要利用光進(jìn)行光合作用。
⑻氣體
動(dòng)物細胞需要不斷供給氧氣和排除二氧化碳，植物細胞與此相反。
二氧化碳的作用：調節pH，有緩沖作用，沒(méi)有刺激動(dòng)物細胞呼吸的功能
4.細胞培養時(shí)要注意哪些事項
即從短期、中期和長(cháng)期三個(gè)階段來(lái)規劃本單位的科研目標，明確各個(gè)階段可以采用的科研工具、相關(guān)的資源需求、人員配置等要素；
相關(guān)的資源收集和管理
根據整體規劃中不同階段的資源需求，進(jìn)行相關(guān)資源的收集和管理；與HIS、LIS等系統接口，信息更加集中，更加易于分析；
保存箱空間利用率
樣本積累到一定數量后，手工方式查找和存放樣本非常困難而且容易出錯，存放樣本的容器（例如冰箱、液氮罐）利用效率也會(huì )逐漸降低。因為一開(kāi)始樣本可能是分類(lèi)順序存放的，但是根據科研需求的不同，取樣會(huì )從容器的不同位置取走樣本，一段時(shí)間后，容器中會(huì )產(chǎn)生大量的零散空位卻無(wú)法有效利用。這就需要利用信息化系統來(lái)進(jìn)行樣本存放位置的自動(dòng)分配和查找，提高冰箱等容器的空間利用效率。
5.細胞培養應注意的無(wú)菌操作主要有哪些
1.打開(kāi)無(wú)菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時(shí)以上。
2.進(jìn)入凈化室前先關(guān)閉紫外燈，打開(kāi)超凈臺風(fēng)機，等待30min以上，以排盡臭氧。 3.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。
4.風(fēng)淋2分鐘。 5.0.1%過(guò)氧乙酸水泡手，擦干。
6.點(diǎn)燃酒精燈；超凈臺內應避免放入過(guò)多的物品；使用的吸管，滴管，試管，培養瓶等均事先滅菌。 7.打開(kāi)各類(lèi)瓶蓋前先過(guò)火，以固定灰塵；打開(kāi)的瓶口、試管口過(guò)火焰，鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。
8.水平式風(fēng)機的超凈臺，應使瓶口斜置，應盡量避免瓶口敞開(kāi)直立。 9.同一根吸管或滴管不應連續用于幾個(gè)不同的細胞系；吸取培養基的吸管應離開(kāi)培養瓶或試管口0.5cm，避免伸入培養瓶口或試管口；以防止細胞系的互相混雜污染。
10.漏在培養瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。 11.操作完畢后恢復工作臺面。
