測(cè)定維生素c還方法(測(cè)定vc有哪幾種方法,每種方法的使用范圍)
1.測(cè)定vc有哪幾種方法,每種方法的使用范圍
維生素C不同的測(cè)定方法 目前研究維生素C測(cè)定方法的報(bào)道較多，有關(guān)維生素C的測(cè)定方法如熒光法、2,6-二氯靛酚滴定法、2,4-二硝基苯肼法、光度分析法、化學(xué)發(fā)光法、電化學(xué)分析法及色譜法等，各種方法對(duì)實(shí)際樣品的測(cè)定均有滿(mǎn)意的效果. 為了解國(guó)內(nèi)VC含量測(cè)定方法及其應(yīng)用方面的現(xiàn)狀及發(fā)展態(tài)勢(shì).方法以"維生素C或抗壞血酸和測(cè)定"為檢索詞對(duì)1994~2002年中國(guó)期刊網(wǎng)全文數(shù)據(jù)庫(kù)（CNKI）中的理工A、B和醫(yī)藥衛(wèi)生專(zhuān)輯進(jìn)行篇名檢索，對(duì)所得有關(guān)維生素C含量測(cè)定的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)分別以年代、作者區(qū)域、載刊等級(jí)、樣品類(lèi)型、測(cè)定方法等進(jìn)行計(jì)量分析.結(jié)果核心期刊載刊文獻(xiàn)占文獻(xiàn)總量的45.06%，其中光度法占65.69%，電化法占18.63%，色譜法占12.75%；復(fù)雜被測(cè)樣品文獻(xiàn)占文獻(xiàn)總量的45.06%，其中光度法占60.92%，色譜法占19.54%，電化法占10.34%.結(jié)論目前國(guó)內(nèi)維生素C含量測(cè)定仍以光度法為主流，但近年來(lái)色譜法，特別是HPLC法上升趨勢(shì)尤為明顯. 一.熒光法 1.原理 樣品中還原型抗壞血酸經(jīng)活性炭氧化成脫氫型抗壞血酸后，與鄰苯二胺（OPDA）反應(yīng)生成具有熒光的喹喔啉（quinoxaline），其熒光強(qiáng)度與脫氫抗壞血酸的濃度在一定條件下成正比，以此測(cè)定食物中抗壞血酸和脫氫抗壞血酸的總量。
脫氫抗壞血酸與硼酸可形成復(fù)合物而不與OPDA反應(yīng)，以此排除樣品中熒光雜質(zhì)所產(chǎn)生的干擾。本方法的最小檢出限為0.022 g/ml。
2.適用范圍 本方法適用于蔬菜、水果及其制品中總抗壞血酸的測(cè)定 3. 注意事項(xiàng) 3.1 大多數(shù)植物組織內(nèi)含有一種能破壞抗壞血酸的氧化酶，因此，抗壞血酸的測(cè)定應(yīng)采用新鮮樣品并盡快用偏磷酸-醋酸提取液將樣品制成勻漿以保存維生C。 3.2 某些果膠含量高的樣品不易過(guò)濾，可采用抽濾的方法，也可先離心，再取上清液過(guò)濾。
3.3活性炭可將抗壞血酸氧化為脫氫抗壞血酸，但它也有吸附抗壞血酸的作用，故活性炭用量應(yīng)適當(dāng)與準(zhǔn)確，所以，應(yīng)用天平稱(chēng)量。我們的實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，用2g活性炭能使測(cè)定樣品中還原型抗壞血酸完全氧化為脫氫型，其吸附影響不明顯。
二、2,6-二氯靛酚滴定法（還原型VC） 1、原理： 還原型抗壞血酸還原染料2,6-二氯靛酚，該染料在酸性中呈紅色，被還原后紅色消失。還原型抗壞血酸還原2,6-二氯靛酚后，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。
在沒(méi)有雜質(zhì)干擾時(shí)，一定量的樣品提取液還原標(biāo)準(zhǔn)2,6-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素C的量成正比。本法用于測(cè)定還原型抗壞血酸，總抗壞血酸的量常用2,4-二硝基苯肼法和熒光分光光度法測(cè)定。
2、注意事項(xiàng) ⑴ 所有試劑的配制最好都用重蒸餾水； ⑵ 滴定時(shí)，可同時(shí)吸二個(gè)樣品。一個(gè)滴定，另一個(gè)作為觀察顏色變化的參考； ⑶ 樣品進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后，應(yīng)浸泡在已知量的2%草酸液中，以防氧化，損失維生素C； ⑷ 貯存過(guò)久的罐頭食品，可能含有大量的低鐵離子（Fe2+），要用8%的醋酸代替2%草酸。
這時(shí)如用草酸，低鐵離子可以還原2,6-二氯靛酚，使測(cè)定數(shù)字增高，使用醋酸可以避免這種情況的發(fā)生； ⑸ 整個(gè)操作過(guò)程中要迅速，避免還原型抗壞血酸被氧化； ⑹ 在處理各種樣品時(shí)，如遇有泡沫產(chǎn)生，可加入數(shù)滴辛醇消除； ⑺ 測(cè)定樣液時(shí)，需做空白對(duì)照，樣液滴定體積扣除空白體積。 3優(yōu)點(diǎn)：它具有簡(jiǎn)便、快速、比較準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)，適用于許多不同類(lèi)型樣品的分析。
缺點(diǎn)是不能直接測(cè)定樣品中的脫氫抗壞血酸及結(jié)合抗壞血酸的含量，易受其他還原物質(zhì)的干擾。如果樣品中含有色素類(lèi)物質(zhì)，將給滴定終點(diǎn)的觀察造成困難。
在酸性環(huán)境中，抗壞血酸（還原型）能將染料2,6—DCIP還原成無(wú)色的還原型2,6—DCIP，而抗壞血酸則被氧化成脫氫抗壞血酸。氧化型2,6—DCIP在中性或堿性溶液中呈藍(lán)色，但在酸性溶液中則呈粉紅色。
因此，當(dāng)用2,6—DICP滴定含有抗壞血酸的酸性溶液時(shí)，在抗壞血酸未被全部氧化前，滴下的2,6—DCIP 立即被還原成無(wú)色，一旦溶液中的抗壞血酸全部被氧化時(shí)，則滴下微量過(guò)剩的2,6—DCIP 便立即使溶液顯示淡粉紅色或微紅色，此時(shí)即為滴定終點(diǎn)，表示溶液中的抗壞血酸剛剛?cè)勘谎趸?。依?jù)滴定時(shí)2,6—DCIP 標(biāo)準(zhǔn)溶液的消耗量 （ml），可以計(jì)算出被測(cè)樣品中抗壞血酸的含量。
氧化型2,6—DCIP與還原型抗壞血酸常在稀草酸或偏磷酸溶液中進(jìn)行反應(yīng)。即先將樣品溶于一定濃度的酸性溶液中或經(jīng)抽提后，再用2,6—DCIP標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至終點(diǎn)。
食物和生物材料中常含有其他還原物質(zhì)，其中有些還原物質(zhì)可使2,6—DCIP還原脫色。為了消除這些還原物質(zhì)對(duì)定量測(cè)定的干擾，可用抗壞血酸氧化酶處理，破壞樣品中還原型抗壞血酸后，再用2,6—DCIP 滴定樣品中其他還原物質(zhì)。
然后從滴定未經(jīng)酶處理樣品時(shí)2,6—DCIP標(biāo)準(zhǔn)溶液的總消耗量中，減去滴定非抗壞血酸還原物質(zhì)2,6—DCIP 標(biāo)準(zhǔn)溶液的消耗量，即為滴定抗壞血酸實(shí)際所消耗的2,6—DCIP標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積，由此可以計(jì)算出樣品中抗壞血酸的含量。另外，還可利用抗壞血酸和其他還原物質(zhì)與2,6—DCIP反應(yīng)速度的差別，并通過(guò)控制樣品溶液在pH1 — 3 范圍內(nèi)，進(jìn)行快速滴定，可以消除或減少其他還原物質(zhì)的作用，一般在這樣的條件下，干擾物質(zhì)與2,6—DCIP的反應(yīng)是很慢的或受到抑制。
生物體液（如血液、尿等）中的。
2.維生素C的測(cè)定方法有哪些,各有何優(yōu)缺點(diǎn),請(qǐng)加以對(duì)比,最好能列表
2.6一二氯酚靛酚滴定法測(cè)定還原型抗壞血酸是多年采用的經(jīng)典方法。該法簡(jiǎn)便易行、快速，目前仍被廣泛運(yùn)用。但此方法尚存著一定均缺點(diǎn)，突出的一點(diǎn)是滴定終點(diǎn)難以確定。利用2.6一二氯酚靛酚滴定含有抗壞血酸的酸性物質(zhì)溶液而當(dāng)抗壞血酸尚未被全部被氧化時(shí)，滴下的2.6一二氮酚靛酚立即被還原成無(wú)色。而溶液中的坑壞血酸一旦被氧化，則滴入的2.6一二氮酚靛酚則立即使溶液呈現(xiàn)紅色。所以，當(dāng)溶液從無(wú)色轉(zhuǎn)變成微紅色時(shí)，即表示溶液中的抗壞血酸剛剛
被全部氧化，此時(shí)為滴定終點(diǎn)。此種方法對(duì)于無(wú)色或淡黃色、綠色樣品液的滴定終點(diǎn)易確定，而對(duì)于山植、大棗、草葺、酸棗等紫色、粉紅或褐色等色澤的朵蔬樣品液的滴定終點(diǎn)就難以觀察確定。為此，往往經(jīng)稀釋?zhuān)砑踊钚蕴?、白陶土?lái)進(jìn)行脫色處理，添加維生素C的方法來(lái)解決。既使如此，仍難得到滿(mǎn)意的結(jié)果，測(cè)定數(shù)據(jù)也很難準(zhǔn)確。為克服以上缺點(diǎn)，近年來(lái)經(jīng)反復(fù)多次的實(shí)驗(yàn)研究，采用2.6一二氯酚靛酚反滴定法測(cè)果蔬中還原抗壞血酸，終于摸索出比較合理的實(shí)
驗(yàn)條件，收到了比較滿(mǎn)意的效果。
3.水果中維生素c含量的測(cè)定方法有幾種
水果中維生素c含量的測(cè)定方法有三種，分別為原子吸收分光光度法、紫外可見(jiàn)分光光度法、高效液相色譜法。
1、原子吸收分光光度法
利用原子吸收分光光度法問(wèn)接測(cè)定維生素C的含量，是利用維生素C可以與一些金屬離子發(fā)生氧化還原反應(yīng)，通過(guò)測(cè)定反應(yīng)掉的金屬離子的量，進(jìn)而間接計(jì)算出維生素c的含量。
2、紫外-可見(jiàn)分光光度法
利用紫外-可見(jiàn)分光光度法測(cè)定維生素C的含量是基于維生素c在紫外光區(qū)有特征吸收，但是因?yàn)榫S生素C結(jié)構(gòu)中具有不飽和鍵，具有還原性，不易穩(wěn)定存在，直接測(cè)定誤差較大。所以在利用紫外分光光度法測(cè)定時(shí)，維生素標(biāo)準(zhǔn)溶液和待測(cè)樣的配制條件非常重要。
3、高效液相色譜法
高效液相色譜法是以液體為流動(dòng)相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將維生素C的溶劑裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測(cè)器進(jìn)行檢測(cè)，從而測(cè)量出維生素c的含量。
擴(kuò)展資料
維生素c含量的測(cè)定方法對(duì)比：
由于維生素C自身的不穩(wěn)定，導(dǎo)致了很多方法測(cè)定結(jié)果誤差較大，所以對(duì)維生素C穩(wěn)定存在條件的探索非常重要。高效液相色譜法因?yàn)闇y(cè)定較準(zhǔn)確、靈敏度高、選擇性好，有較好的發(fā)展前景，是目前發(fā)展較快的一種方法。
參考資料來(lái)源：百度百科-維生素c
百度百科-高效液相色譜
百度百科-原子吸收分光光度法
百度百科-紫外-可見(jiàn)分光光度法
4.蔬菜中維生素c的測(cè)定方法有哪些
取4g新鮮的土豆用刀切碎，再用研磨研磨成像土豆泥的樣子。
2
用5ml2%草酸加到研缽中進(jìn)行溶解，并用50ml容量瓶進(jìn)行定容。
3
定容后上下?lián)u晃，以使溶劑溶解充分，并用漏斗的濾紙析出純凈的濾液。
4
取析出的濾液進(jìn)行滴定，共取30ml。分三次，每次10ml。最后取平均值。滴定終點(diǎn)是出現(xiàn)粉紅并且15s內(nèi)不褪色即可。記錄下每次滴定所用的2,6-二氯酚靛酚溶液的體積。
5
實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，所滴定的溶液的顏色，為粉紅色。
END
2,6-二氯酚靛酚的標(biāo)定（測(cè)出公式中的K值）
分別取5ml標(biāo)準(zhǔn)的維生素 C（里加5ml1%的草酸），和5ml,1%的草酸進(jìn)行滴定。
用2,6-二氯酚靛酚進(jìn)行的標(biāo)定，兩瓶都進(jìn)行三次，最后取平均值。
END
注意事項(xiàng)
計(jì)算公式： 1.根據(jù)滴定前后的物質(zhì)的量（n）不變，可以得出CV=cv，化簡(jiǎn)可得到，1ml2,6-二氯酚靛酚的標(biāo)定所對(duì)應(yīng)的維生素的含量，這樣已知2,6-二氯酚靛酚的標(biāo)定，就知道維生素的的含量了，然后除以提取的樣品比，救治總樣品含多少了。
分步解釋?zhuān)旱谝徊剑褱y(cè)出樣品中含草酸的維生素和草酸得含量，是用2,6-二氯酚靛酚的標(biāo)定體積表示的，轉(zhuǎn)化成樣品的維生素C的含量。第二步，實(shí)驗(yàn)二已測(cè)出K值，（質(zhì)量乘體積的比是相等的，參看注意事項(xiàng)一說(shuō)的）。然后用其和總質(zhì)量乘體積的比，算出維生素C的含量，轉(zhuǎn)化為百分?jǐn)?shù)。
5.維生素C的測(cè)量方法（滴定）有哪幾種
蔬菜中維生素C的測(cè)量
用品：試管、研缽、紗布、西紅柿、黃瓜、淀粉碘酒溶液、氫氧化鈉溶液。
原理：維生素C又叫抗壞血酸，它的第2、3碳位的烯醇結(jié)構(gòu)具有很強(qiáng)的還原性，能把碘原子還原成碘離子，使原來(lái)淀粉遇碘所顯示的藍(lán)色自行褪去。維生素C在受熱及堿性條件下，易分解破壞。
操作：
1.制備汁液：取新鮮西紅柿、黃瓜各100g，洗凈后在研缽中搗爛，用紗布包住擠出汁液待用。
2.取上述制出的汁液各1mL，分盛兩支試管中，各加6滴淀粉碘酒溶液，發(fā)現(xiàn)顏色變化是：西紅柿汁中藍(lán)色褪，黃瓜汁中還有較淺的藍(lán)色。
3.取由1制出的汁液各1mL，加熱至沸，并保持沸騰約15min，然后加入淀粉碘酒溶液各6滴，發(fā)現(xiàn)藍(lán)色基本保持不變。
4.取由1制出的汁液各1mL，各加氫氧化鈉溶液各6滴，振蕩均勻后，各加淀粉碘酒溶液各6滴，發(fā)現(xiàn)藍(lán)色基本保持不變。
結(jié)論：
1.蔬菜中維生素C的含量，是依據(jù)相同實(shí)驗(yàn)條件下藍(lán)色的褪色程度來(lái)確定，藍(lán)色深則含量低，藍(lán)色愈淺則含量愈高。
2.蔬菜燒煮時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)，也不能加堿，否則維生素C被破壞。
6.測(cè)量維生素C時(shí)應(yīng)注意哪些操作步驟
在測(cè)定維生素C的國(guó)標(biāo)方法中，熒光法為測(cè)定食物中維生素C含量的第一標(biāo)準(zhǔn)方法，2、4-二硝基苯肼法作為第二法。
熒光法操作注意事項(xiàng)：
1大多數(shù)植物組織內(nèi)含有一種能破壞抗壞血酸的氧化酶，因此，抗壞血酸的測(cè)定應(yīng)采用新鮮樣品并盡快用偏磷酸-醋酸提取液將樣品制成勻漿以保存維生素C。
2 某些果膠含量高的樣品不易過(guò)濾，可采用抽濾的方法，也可先離心，再取上清液過(guò)濾。
3活性炭可將抗壞血酸氧化為脫氫抗壞血酸，但它也有吸附抗壞血酸的作用，故活性炭用量應(yīng)適當(dāng)與準(zhǔn)確，所以，應(yīng)用天平稱(chēng)量。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明，用2g活性炭能使測(cè)定樣品中還原型抗壞血酸完全氧化為脫氫型，其吸附影響不明顯。
2、4-二硝基苯肼法操作注意事項(xiàng)：
1大多數(shù)植物組織內(nèi)含有一種能破壞抗壞血酸的氧化酶，因此，抗壞血酸的測(cè)定應(yīng)采用新鮮樣品并盡快用2%草酸溶液制成勻漿以保存維生素C。
2 若溶液中含有糖，硫酸加得太快，溶解熱會(huì)使溶液變黑。
3 試管自冰水中取出后，顏色會(huì)繼續(xù)變深，所以，加入硫酸后30分鐘應(yīng)準(zhǔn)時(shí)比色。
