常用的實(shí)驗室診斷方法(常用的實(shí)驗室診斷方法是什么)
1.常用的實(shí)驗室診斷方法是什么
按實(shí)驗方法，實(shí)驗室診斷大致可分為：病理組織學(xué)診斷、微生物診斷、免疫學(xué)診斷、分子生物學(xué)診斷等。
從檢測目標來(lái)看，應當是兩方面，一方面是檢測病原或致病因素，如活的病原，病原的部分蛋白質(zhì)，病原的核酸，引起中毒的毒素；另一方面，感染病原微生物后機體發(fā)生的變化，也就是機體對病原或致病因子的反應，包括病理組織學(xué)反應，即病理組織學(xué)變化；病理生理學(xué)反應，如血常規檢驗、血液生化檢驗、血液中酶活性的測定、肝功能和腎功能檢驗等；免疫學(xué)反應，可分為體液免疫反應、細胞免疫反應。不同的診斷方法各有優(yōu)勢，也各有缺陷，例如，常規病理組織學(xué)方法步驟固定、簡(jiǎn)單，可以觀(guān)察到機體組織細胞形態(tài)的變化，特征性病變可以為診斷帶來(lái)很大幫助，甚至可以確診，但也存在同樣的病變可能由不同的疾病引起的問(wèn)題，另外所需時(shí)間較長(cháng)，需24小時(shí)以上才能觀(guān)察結果。
不同的疾病特點(diǎn)不同，診斷方法也有差異，應根據情況加以選擇。
2.實(shí)驗室診斷方法包括哪些內容
①病理組織學(xué)檢查腦觸片法是迅速而經(jīng)濟的方法，將腦 炎癥狀的患病動(dòng)物捕殺，取大腦海馬角或小腦作觸片，染色鏡 檢，觀(guān)察有無(wú)內基氏小體。
融片法不能獲得陽(yáng)性結果時(shí)，可將腦組織作成病理切片 （冷凍或石蠟包埋切片）用H。E染色，鏡檢，內基氏小體呈紅 褐色。
②突光抗體法是一種迅速而特異性很強的診斷方法。聯(lián) 合國世界衛生組織曾推薦，許多國家已廣泛應用。
方法是將狂犬病高免血清的球蛋白提純，用異硫氰熒光素 痧記，制成熒光抗本。取可疑清腦組織或唾液腺制成觸片或冰 凍切片，用熒光抗體染色，在熒光顯微鏡下觀(guān)察，胞漿內出現黃 綠色熒光顆粒者即為陽(yáng)性。
③動(dòng)物接種法是較準確的方法，但耗時(shí)較長(cháng)，需觀(guān)察3個(gè) 星期才能做出診斷結果。方法是取腦病料制成乳劑，用30曰齡 靜小鼠，經(jīng)腦內接種，如有狂犬病病毒則在接種后1 ~2周內小 鼠出現麻痹癥狀與腦膜炎變化。
或者于接種后3天捕殺小鼠， 取膨制觸片，用熒光抗體法檢查，可以縮短診斷時(shí)間。 。
3.臨床診斷的方法有哪幾種
臨床上常用的診斷方法主要有視診、問(wèn)診、觸診及嗅診4種。每一種方法各有其特點(diǎn)，反映出不同的結果，將這些結果綜合起來(lái)加以分析，結合實(shí)驗室診斷，可為最后確診提供參考的依據。
(1)視診
視診是用肉眼直接觀(guān)察病貂的整體概況或某些局部癥狀的方法。通過(guò)肉眼觀(guān)察，看病貂的異常表現，如精神狀態(tài)，眼睛靈活性，被毛的完整性和光澤度，鼻鏡和眼的干濕度，采食情況，糞便的變化，飲水量多少，呼吸表現，頭、頸、軀干、四肢和尾有無(wú)異常變化等。根據視診所見(jiàn)典型癥狀亦可做出初步診斷。
(2)問(wèn)診
首先向場(chǎng)中有關(guān)人員了解飼養管理的情況，如飼料的種類(lèi)變化、來(lái)源、品種、質(zhì)量、貯藏等情況，日糧組成，飼料單變化時(shí)間，變更前后貂群食欲變化，飼料加工情況等。然后，再向飼養員了解病貂的情況。例如，什么時(shí)間出現食欲不振，有什么異常現象，糞便的變化，以前得過(guò)哪些病等。
(3)觸診
觸診是用檢查者的手感覺(jué)檢查疾病。觸診可以確定視診所見(jiàn)癥狀的性質(zhì)，補充視診的不足。觸摸患貂的趾端和患部的溫度、硬度，局部有無(wú)波動(dòng)，以及皮膚的完整性如何等。觸診對診斷水貂黃脂肪病、膿腫、膀胱結石有實(shí)用意義。黃脂肪病在鼠蹊部皮下可觸摸到面團狀或索狀的硬脂肪、塊。
(4)嗅診
用診斷的嗅覺(jué)，去識別病貂的分泌物和排泄物的氣味，有無(wú)特殊的腥臭味。犬瘟熱病患貂發(fā)生化膿性結膜炎、鼻炎尤其是皮炎時(shí)，可聞到特殊的腥臭味。
4.病原微生物常用的實(shí)驗室檢測技術(shù)有哪些
1、外部質(zhì)量控制 外部質(zhì)量控制，顧名思義就是利用實(shí)驗室以外的質(zhì)量控制手段來(lái)保證檢測結果所采取的方式，一般分為能力驗證和實(shí)驗室間比對。
1.1能力驗證 能力驗證，指利用實(shí)驗室間比對，按照預先制定的準則評價(jià)參加者的能力，是認可機構加入和維持國際相互承認協(xié)議（MRA）的必要條件之一，是實(shí)驗室重要、有效的外部質(zhì)量控制活動(dòng)。 實(shí)驗室每年可在中國合格評定國家認可委員會(huì )（CNAS，以下稱(chēng)CNAS）官方網(wǎng)站查詢(xún)年度能力驗證計劃，針對性地選擇參加能力驗證的項目。
實(shí)驗室通過(guò)報名的方式參與驗證并領(lǐng)取檢測樣品，根據規定的方案完成檢測后在規定的時(shí)間反饋給組織能力驗證的機構，能力驗證組織機構根據所有參與實(shí)驗室的檢測結果進(jìn)行統計分析后出具能力驗證結果報告，實(shí)驗室應根據結果報告評價(jià)自己的檢測能力。能力驗證的評價(jià)方法包括：1、量值比對的評價(jià)參數（En）：若|En|≤1，滿(mǎn)意、通過(guò)；若|En|>1，不滿(mǎn)意，不通過(guò)。
2、檢測比對評價(jià)參數（Z）:|Z|≤2，滿(mǎn)意、通過(guò)；|Z|≥3，不滿(mǎn)意、不通過(guò)；2<|Z|<3，可疑。 當能力驗證出現不滿(mǎn)意結果時(shí)，實(shí)驗室應深入分析原因、實(shí)施糾正措施，并驗證措施的有效性；當出現可疑結果時(shí)，實(shí)驗室應分析原因，并視其嚴重程度、影響范圍等必要時(shí)采取糾正措施。
參加能力驗證是一種非常有效的外部質(zhì)量控制方式，它不僅可以確定和監控實(shí)驗室檢測的能力、持續能力，亦可以有效識別實(shí)驗室存在問(wèn)題。但由于能力驗證受年度計劃的制約，有時(shí)會(huì )出現實(shí)驗室某些檢測項目不在計劃之列而無(wú)法確認能力的情況，因此需要開(kāi)展實(shí)驗室間比對來(lái)補充。
1.2實(shí)驗室間比對 實(shí)驗室間比對，指按照預先規定的條件，由兩個(gè)或多個(gè)實(shí)驗室對相同或類(lèi)似的測試樣品進(jìn)行檢測的組織、實(shí)施和評價(jià)，從而識別實(shí)驗室存在的問(wèn)題與實(shí)驗室間的差異。 開(kāi)展實(shí)驗室間比對一般可通過(guò)兩種方式進(jìn)行，一種是自主組織，另一種是以參與者身份參加。
作為組織者，實(shí)驗室首先要選擇適宜的比對實(shí)驗室，為確保比對結果的可信度，建議盡可能選擇已獲得CNAS認可、計量認證或行業(yè)內權威的實(shí)驗室；實(shí)驗室還應合理編制比對方案，方案應包括采用的方法、測試的項目、數據分析處理方法、樣品數量及必要信息、實(shí)驗要求、測試結果等內容，并與參與實(shí)驗室達成一致意見(jiàn)；最后，組織者根據測試結果編制比對報告，明確比對的結論及需要改進(jìn)的問(wèn)題、改進(jìn)措施等。 實(shí)驗室通過(guò)開(kāi)展實(shí)驗室間比對，及時(shí)發(fā)現存在的問(wèn)題以及與其他實(shí)驗室的差異，從而查找原因并及時(shí)改進(jìn)。
與能力驗證比較，它的靈活性更強，可作為實(shí)驗室外部質(zhì)量控制的常用手段。 2、內部質(zhì)量控制 內部質(zhì)量控制，指實(shí)驗室為確保檢測結果的有效性而利 用自身資源在實(shí)驗室內部實(shí)施的質(zhì)量控制，一般包括使用標物監控、人員比對、儀器比對、方法比對、留樣再測、分析物品不同特性結果的相關(guān)性等方法。
2.1人員比對 即實(shí)驗室檢測技術(shù)人員之間的能力比對，由不同的檢測技術(shù)人員利用相同的儀器、使用相同的方法、在相同的檢測條件下對同一特殊物質(zhì)進(jìn)行測試，將獲取的數據來(lái)進(jìn)行評價(jià)。可作為新員工培訓后驗證其技術(shù)能力的手段，亦可在有多名檢測人員的實(shí)驗室開(kāi)展。
2.2儀器比對 即檢測儀器之間的比對，使用不同的檢測儀器、由相同的檢測人員、采用相同的方法、在相同的檢測條件下對同一檢測樣品進(jìn)行測試，將獲取的數據進(jìn)行評價(jià)，以確定儀器間的差異。當實(shí)驗室擁有不同設備時(shí)，可采用儀器比對的方法開(kāi)展質(zhì)量控制，特別可用于當某臺儀器參加能力驗證獲得滿(mǎn)意結果時(shí)，可用其來(lái)衡量其他儀器的可信度。
2.3方法比對 即檢測方法之間的對比，使用不同的檢測方法，在相同的人員、相同的儀器、相同的檢測條件下對同一檢測樣品進(jìn)行測試，將獲取的數據進(jìn)行評價(jià)，以確定方法間的差異。當實(shí)驗室使用新方法、超出預期使用的標準方法、實(shí)驗室制定的方法以及擴充或修改的標準方法時(shí)，可與標準方法進(jìn)行比對，以證實(shí)該方法是否適用于預期的用途。
2.4分析物品不同特性結果的相關(guān)性 這種方法是樣品中同時(shí)存在若干特性，特性問(wèn)題有確定的關(guān)系，當這些特性被試驗確定后，通過(guò)考察實(shí)驗結果中表現出的特性間的關(guān)系是否違背已知關(guān)系來(lái)判斷實(shí)驗結果的正確性。這些相關(guān)特性間常存在因果關(guān)系，因此相關(guān)特性分析的方方可以用于實(shí)驗條件與被測性能間的相關(guān)關(guān)系的分析。
以上分析看出，內部質(zhì)量控制操作方便、方法多樣、易于實(shí)施，可作為實(shí)驗室日常的質(zhì)量控制手段。 3、小結 實(shí)驗室的質(zhì)量控制是保證實(shí)驗室檢測結果的準確性、有效性的重要手段，是實(shí)驗室持續改進(jìn)管理體系的有效工具，是實(shí)驗室管理中的永恒主題。
因此，實(shí)驗室應結合自身的實(shí)際情況，自覺(jué)地、經(jīng)常地、有計劃地、針對性地開(kāi)展質(zhì)量控制活動(dòng)，并利用其數據進(jìn)行深入分析，查找不足并加以改進(jìn)，使實(shí)驗室的管理水平和技術(shù)能力得到不斷提高。 參考文獻 [1]CNAS-CL01 《檢測和校準實(shí)驗室能力認可準則》 [2]CNAS-RL01 《實(shí)驗室認可規則》 [3]CNAS-RL02 《能力驗證規則》。
5.雞病的實(shí)驗室診斷方法有哪些
雞病的實(shí)驗室診斷因病因不同而診斷方法各異，主要方法有以 下幾種。
（1）細菌性檢驗①細菌的形態(tài)鑒定。細菌微小，必須借助于光學(xué)顯微鏡才能看 到。
細菌從形態(tài)上可分為球狀、桿狀和螺旋狀3種基本類(lèi)型。細菌 細胞由細胞壁、胞漿膜、細胞質(zhì)及細胞核等部分構成。
有的細菌除 具有基本構造外還能形成莢膜、芽孢、鞭毛和菌毛等特殊構造。細菌的形態(tài)、大小及染色特性是鑒定細菌的重要標志。
細菌染色方法 有單染色法（如亞甲藍染色法）、復染色法（如革蘭氏染色法、姬氏 染色法）、芽孢染色法、鞭毛染色法、抗酸染色法、負染色法、雷別 格爾莢膜染色法、螺旋體染色法等。 ②細菌的生化特性鑒定。
各種細菌具有各自獨立的酶系統，所 以在相應的培養基上生長(cháng)時(shí)，產(chǎn)生不同的代謝產(chǎn)物，據此可鑒定各 種細菌。細菌的生化反應在種、型的鑒別上具有重要意義。
進(jìn)行生 化性狀檢査，必須用純培養物進(jìn)行。生化性狀檢查的項目很多，應 按診斷需要適當選擇。
常用的生化檢測方法有糖類(lèi)發(fā)酵試驗、V-P 試驗、甲基紅試驗、靛基質(zhì)形成試驗、硫化氫產(chǎn)生試驗、硝酸鹽還 原試驗、亞甲藍還原試驗、尿素酶試驗、明膠液化試驗等。③動(dòng)物接種實(shí)驗。
可用采取的病料或分離的病原，人工接種易 感動(dòng)物，根據其致病力、癥狀、病理變化等特點(diǎn)來(lái)幫助診斷，從而 判斷所分離菌是否為主要的病原菌。 ④細菌的藥敏試驗。
對分離出的病原菌進(jìn)行藥物敏感試驗，篩 選出高度敏感的藥物用于防治該菌引起的感染。（2）病毒學(xué)檢驗①病毒的形態(tài)觀(guān)察。
病毒的形態(tài)有圓形、絲狀和彈狀等，其形 態(tài)觀(guān)察常借助于電子顯微鏡。各種病毒的大小和形態(tài)結構是鑒定病 毒的初步依據之一。
電子顯微鏡常用技術(shù)包括超薄切片、負染技術(shù)和真空噴鍍術(shù)等。②病毒的分離培養。
病毒沒(méi)有獨立的酶系統，不能在無(wú)生命的培養基上生長(cháng)，常用的分離培養方法有實(shí)驗動(dòng)物試驗、雞胚接種和基組織細胞培養3種。現在細胞培養已成為病毒培養檢查的常用手段，雞胚和實(shí)驗動(dòng)物培養法現在較少使用。
（3）血清學(xué)檢驗血清學(xué)檢驗是建立在抗原與相應抗體發(fā)生反 應這一原理的基礎上，有的反應是不可見(jiàn)狀態(tài)，可應用補體、溶血 及熒光素、酶和同位素標記等指示系統，使其成為可見(jiàn)或可測狀態(tài)。血清學(xué)檢驗方法具有嚴格的特異性和較高的敏感性，在傳染病的診 斷、病原微生物的分類(lèi)和鑒定以及抗原分析等方面，均具有廣泛的 應用。
用已知的抗體，可以對分離的病原微生物進(jìn)行鑒定。相反，通過(guò)已知的抗原對康復雞、隱性感染雞及接種疫苗后的雞的抗體可 以進(jìn)行定性或定量測定。
血清學(xué)檢驗方法主要有：①直接凝集試驗。細菌、紅細胞等顆粒性抗原與相應的抗體在 電解質(zhì)參與下，發(fā)生反應相互凝集形成團塊，這種現象稱(chēng)凝集反應。
按試驗方法分為試管法、玻片法、玻板法及微量凝集法等。②間接凝集試驗。
將可溶性抗原（或抗體）吸附于與免疫無(wú)關(guān) 的小顆粒（載體）的表面，此吸附抗原（或抗體）的載體顆粒與相 應的抗體（或抗原）結合，在有電解質(zhì)存在的適宜條件下發(fā)生凝集 現象，因此稱(chēng)為間接凝集試驗，也稱(chēng)為被動(dòng)凝集試驗。 常用的載體 有動(dòng)物紅細胞，聚苯乙烯乳膠乃至細胞和活性炭等。
吸附抗原后的 顆粒稱(chēng)為致敏顆粒。③血凝與血凝抑制試驗。
有許多病毒能夠凝集某些動(dòng)物和人的 紅細胞，而這種血凝作用可被特異性抗體所抑制。借此，可應用標 準病毒懸液測定血清中的相應抗體或應用特異性抗體鑒定新分離的 病毒。
血凝與血凝抑制試驗是診斷雞新城疫的重要手段，按試驗方 法分為微量血凝試驗、微血凝抑制試驗等。④沉淀試驗。
可溶性抗原與相應抗體結合，在有電解質(zhì)存在時(shí) 可形成肉眼可見(jiàn)的白色沉淀物，這個(gè)過(guò)程稱(chēng)為沅淀反應。參與沉淀 反應的抗原稱(chēng)為沉淀原，抗體稱(chēng)為沉淀素。
沉淀反應有液相和固相 之分，液相沉淀反應中以環(huán)狀沉淀反應最常用，固相沉淀反應主要 有瓊脂擴散試驗，瓊脂擴散試驗與電泳技術(shù)相結合，又發(fā)展成免疫 電泳技術(shù)。⑤紅細胞吸附和紅細胞吸附抑制試驗。
又稱(chēng)血球吸附和血球吸 附抑制試驗。某些病毒如正黏病毒、副黏病毒和痘病毒等，在培養 的細胞內增殖后，可使培養的細胞吸附某些動(dòng)物的紅細胞，而且只 有感染細胞的表面能吸附紅細胞，不感染的細胞不吸附紅細胞，因 此，可以作為這些病毒增殖的指征。
紅細胞吸附現象也可被特異抗 血清所抑制，故對病毒鑒定，尤其是對某些不產(chǎn)生細胞病變的病毒 來(lái)說(shuō)，常是一個(gè)較好的快速鑒定方法。⑥補體結合試驗。
可溶性抗原，如蛋白質(zhì)、多糖、類(lèi)脂質(zhì)、病 毒等，與相應抗體結合后，其抗原抗體復合物可結合補體，但這一反應肉眼無(wú)法觀(guān)察，如再加人溶血系統，即可通過(guò)觀(guān)察是否溶血來(lái) 判斷反應系統是否存在相應抗原抗體，參與補體結合的抗體稱(chēng)為補 體結合抗體。 ⑦中和試驗。
病毒與相應的中和抗體結合后，可使病毒喪失感 染力。中和反應不僅具有高度的種、型特異性，而且一定量的病毒 必須有相應量的中和抗體才能被中和。
因此中和試驗不僅可用于病 毒種類(lèi)鑒定，還可用于中和抗體的效價(jià)滴定。⑧免疫標記技術(shù)。
利用某些能夠通過(guò)某種特殊理化因素而易于 檢測的物質(zhì)標記抗體，這些被標記的抗體與相應抗原結合，通。
