如何分析蛋白質(zhì)的亞細胞定位
預測蛋白質(zhì)的亞細胞定位,是通過(guò)生物信息學(xué)的方法的。
或者你在NCBI數據庫中比對到了編碼類(lèi)似蛋白的基因,如果該基因有人做過(guò)亞細胞定位的實(shí)驗,你也可以大概知道其編碼的蛋白質(zhì)在細胞內部的定位。不同物種,不同基因家族成員有可能有區別。最終還是需要實(shí)驗來(lái)驗證的。
功能基因研究中,經(jīng)常會(huì )進(jìn)行基因編碼的蛋白質(zhì)的亞細胞定位的,
如待定位蛋白和GFP、YFP、RFP等融合后,觀(guān)察融合蛋白在細胞內的定位,
或者將預測部位(如該蛋白可能在液泡膜上)的蛋白提取出來(lái),進(jìn)行western實(shí)驗,來(lái)驗證等。
預測蛋白質(zhì)的亞細胞定位,是通過(guò)生物信息學(xué)的方法的。
或者你在NCBI數據庫中比對到了編碼類(lèi)似蛋白的基因,如果該基因有人做過(guò)亞細胞定位的實(shí)驗,你也可以大概知道其編碼的蛋白質(zhì)在細胞內部的定位。不同物種,不同基因家族成員有可能有區別。
最終還是需要實(shí)驗來(lái)驗證的。功能基因研究中,經(jīng)常會(huì )進(jìn)行基因編碼的蛋白質(zhì)的亞細胞定位的,如待定位蛋白和GFP、YFP、RFP等融合后,觀(guān)察融合蛋白在細胞內的定位,或者將預測部位(如該蛋白可能在液泡膜上)的蛋白提取出來(lái),進(jìn)行western實(shí)驗,來(lái)驗證等。
希望對你有幫助吧。
預測蛋白質(zhì)的亞細胞定位,是通過(guò)生物信息學(xué)的方法的。
或者你在NCBI數據庫中比對到了編碼類(lèi)似蛋白的基因,如果該基因有人做過(guò)亞細胞定位的實(shí)驗,你也可以大概知道其編碼的蛋白質(zhì)在細胞內部的定位。不同物種,不同基因家族成員有可能有區別。最終還是需要實(shí)驗來(lái)驗證的。
功能基因研究中,經(jīng)常會(huì )進(jìn)行基因編碼的蛋白質(zhì)的亞細胞定位的,
如待定位蛋白和GFP、YFP、RFP等融合后,觀(guān)察融合蛋白在細胞內的定位,
或者將預測部位(如該蛋白可能在液泡膜上)的蛋白提取出來(lái),進(jìn)行western實(shí)驗,來(lái)驗證等。
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1.對活細胞和組織或細胞組織切片進(jìn)行連續斷層掃描,能獲得精細的單個(gè)細胞或一群細胞或所觀(guān)察的局部組織的各個(gè)層面結構(包括細胞特異結構-如細胞骨架、染色體、細胞器和細胞膜系統,樣品的深層結構)和完整的3D圖像;2. 細胞內離子熒光標記,單標記、雙標記或三標記,甚更高多重標記,檢測細胞內如pH和鈉、鉀、鈣、鎂等離子濃度的比率測定及其動(dòng)態(tài)變化;3.熒光標記探針標記的活細胞或切片標本的細胞生物物質(zhì),膜標記、細胞示蹤、免疫物質(zhì)、免疫反應、受體或配體,核酸等觀(guān)察;可以在同一張樣品上進(jìn)行同時(shí)多重物質(zhì)標記,同時(shí)觀(guān)察;4.熒光檢測快、激發(fā)光強度精確控制、光漂白和熒光淬滅作用小;5.對細胞檢測無(wú)損傷、精確、準確、可靠和優(yōu)良重復性;數據圖象可及時(shí)輸出或長(cháng)期儲存。
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