細(xì)胞實驗的方法(生物的實驗方法)
1.生物的實驗方法有哪些
(1)顯微觀察法，如觀察植物細(xì)胞有絲分裂、觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動、觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原實驗等.
(2)觀色法，如觀察動物毛色和植物花色的遺傳等.
(3)原子示綜法，如噬菌體浸染細(xì)菌的實驗，用18O2和14CO2追蹤光合作用中氧原子和碳原子轉(zhuǎn)移途徑的實驗等.
(4)等組實驗法，如小麥淀粉酶催化淀粉水解的實驗，發(fā)現(xiàn)生長素的燕麥胚芽鞘實驗等.
(5)加法創(chuàng)意法，如用飼喂法研究甲狀腺激素，用注射法研究動物胰島素和生長激素，用移植法研究性激素等.
(6)減法創(chuàng)意法，如用閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素和生長激素的實驗，雌蕊受粉后除去正在發(fā)育著的種子等.
(7)雜交實驗法，如孟德爾發(fā)現(xiàn)遺傳定律的植物雜交、測交的實驗，小麥的雜交等.
(8)化學(xué)分析法，如番茄和水稻對Ca和Si選擇性吸收，葉綠體中色素的提取和分離實驗等.
(9)理論分析法，如大、小兩種草履蟲競爭的實驗，植物根向地生長、莖背地生長的實驗，植物向光性實驗等.
(10)模擬實驗法，如滲透作用的實驗裝置，分離定律的模擬實驗等
2.生物實驗有多少種實驗方法
1.顯微觀察法：如“觀察細(xì)胞有絲分裂”“觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動”“用顯微鏡觀察多種多樣的細(xì)胞”等.
2.觀色法：如“生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的鑒定”“觀察動物毛色和植物花色的遺傳”“DNA和RNA的分布”等.
3.同位素標(biāo)記法（元素示蹤法）：如“噬菌體浸染細(xì)菌的實驗”“恩格爾曼實驗”等.
4.補充法：如用飼喂法研究甲狀腺激素，用注射法研究動物胰島素和生長激素，用移植法研究性激素等.
5.摘除法：如用“閹割法、摘除法研究性激素、甲狀腺激素或生長激素的作用”“雌蕊受粉后除去正在發(fā)育著的種子”等.
6.雜交法：如植物的雜交、測交實驗等.
7.化學(xué)分析法：如“番茄對Ca和Si的選擇吸收”“葉綠體中色素的提取和分離”等.
8.理論分析法：如“大、小兩種草履蟲的競爭實驗”“植物向性動物的研究”等.
9.模擬實驗法：如“滲透作用的實驗裝置”“分離定律的模擬實驗”等.
10.引流法：臨時裝片中液體的更換，用吸水紙在一側(cè)吸引，于另一側(cè)滴加換進(jìn)的液體.
3.高中生物常用的實驗方法有哪些
1.實驗方法
實驗方法是整個實驗設(shè)計的精髓，是做好實驗設(shè)計的關(guān)鍵所在。現(xiàn)將與中學(xué)實驗有關(guān)的一些最常見的經(jīng)典的實驗方法匯總?cè)缦拢?/p>
(1)化學(xué)物質(zhì)的檢測方法：
①淀粉——碘液
②還原糖——斐林試劑、班氏試劑
③CO2——Ca(OH)2溶液或酸堿指示劑
④乳酸——pH試紙
⑤O2——余燼復(fù)燃
⑥無O2——火焰熄滅
⑦蛋白質(zhì)——雙縮脲試劑
⑧染色體——龍膽紫、醋酸洋紅溶液
⑨DNA——二苯胺試劑
⑩脂肪——蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液
(2)實驗結(jié)果的顯示方法：
①光合速率——O2釋放量或CO2吸收量或淀粉產(chǎn)生量
②呼吸速率——O2吸收量或CO2釋放量或淀粉減少量
③原子途徑——放射性同位素示蹤法
④細(xì)胞液濃度大小——質(zhì)壁分離
⑤細(xì)胞是否死亡——質(zhì)壁分離
⑥甲狀腺激素作用——動物耗氧量，發(fā)育速度等
⑦生長激素作用——生長速度（體重變化，身高變化）
⑧胰島素作用——動物活動狀態(tài)
⑨菌量——菌落數(shù)或亞甲基藍(lán)溶液褪色程度
⑩大腸桿菌——伊紅—美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基
(3)實驗條件的控制方法：
①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物
②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水
③除去容器中CO2——NaOH溶液
④除去葉片中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境
⑤除去葉片中葉綠素——酒精隔水加熱
⑥除去光合作用對呼吸作用的干擾——給植株遮光
⑦如何得到單色光——棱鏡色散或彩色薄膜濾光
⑧血液抗凝——加入檸檬酸鈉
⑨線粒體提取——細(xì)胞勻漿離心
⑩骨的脫鈣——鹽酸溶液
⑾滅菌方法——微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵在于滅菌，對不同材料，滅菌方法不同：培養(yǎng)基用高壓蒸氣滅菌；接種環(huán)用火焰灼燒滅菌；雙手用肥皂洗凈，擦干后用75%酒精消毒；整個接種過程都在實驗室無菌區(qū)進(jìn)行。
4.初中生物實驗方法有哪些
實驗方法是整個實驗設(shè)計的精髓，是做好實驗設(shè)計的關(guān)鍵所在.現(xiàn)將與中學(xué)實驗有關(guān)的一些最常見的經(jīng)典的實驗方法匯總?cè)缦拢?/p>
(1)化學(xué)物質(zhì)的檢測方法：
①淀粉——碘液
②還原糖——斐林試劑、班氏試劑
③CO2——Ca(OH)2溶液或酸堿指示劑
④乳酸——pH試紙
⑤O2——余燼復(fù)燃
⑥無O2——火焰熄滅
⑦蛋白質(zhì)——雙縮脲試劑
⑧染色體——龍膽紫、醋酸洋紅溶液
⑨DNA——二苯胺試劑
⑩脂肪——蘇丹Ⅲ或蘇丹Ⅳ染液
(2)實驗結(jié)果的顯示方法：
①光合速率——O2釋放量或CO2吸收量或淀粉產(chǎn)生量
②呼吸速率——O2吸收量或CO2釋放量或淀粉減少量
③原子途徑——放射性同位素示蹤法
④細(xì)胞液濃度大小——質(zhì)壁分離
⑤細(xì)胞是否死亡——質(zhì)壁分離
⑥甲狀腺激素作用——動物耗氧量，發(fā)育速度等
⑦生長激素作用——生長速度（體重變化，身高變化）
⑧胰島素作用——動物活動狀態(tài)
⑨菌量——菌落數(shù)或亞甲基藍(lán)溶液褪色程度
⑩大腸桿菌——伊紅—美藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基
(3)實驗條件的控制方法：
①增加水中氧氣——泵入空氣或吹氣或放入綠色植物
②減少水中氧氣——容器密封或油膜覆蓋或用涼開水
③除去容器中CO2——NaOH溶液
④除去葉片中原有淀粉——置于黑暗環(huán)境
⑤除去葉片中葉綠素——酒精隔水加熱
⑥除去光合作用對呼吸作用的干擾——給植株遮光
⑦如何得到單色光——棱鏡色散或彩色薄膜濾光
⑧血液抗凝——加入檸檬酸鈉
⑨線粒體提取——細(xì)胞勻漿離心
⑩骨的脫鈣——鹽酸溶液
⑾滅菌方法——微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵在于滅菌，對不同材料，滅菌方法不同：培養(yǎng)基用高壓蒸氣滅菌；接種環(huán)用火焰灼燒滅菌；雙手用肥皂洗凈，擦干后用75%酒精消毒；整個接種過程都在實驗室無菌區(qū)進(jìn)行.
(4)實驗中控制溫度的方法：
①還原糖鑒定：水浴煮沸加熱
②酶促反應(yīng)：水浴保溫
③用酒精溶解葉中的葉綠素：酒精要隔水加熱
④DNA的鑒定：水浴煮沸加熱
⑤細(xì)胞和組織培養(yǎng)以及微生物培養(yǎng)：恒溫培養(yǎng)
5.細(xì)胞生物學(xué)實驗中常用來固定細(xì)胞或細(xì)胞器的方法有哪些
細(xì)胞固定化方法有：Adsorption（吸附）；covalent bonding（共價結(jié)合）；Cross linking（交聯(lián)）；Entrapment（包埋）、Encapsulation（微膠囊） 。下面對這幾種做具體介紹。
一、吸附法
1，原理
利用載體和細(xì)胞表面所帶電荷的靜電引力（van der Walls forces），使細(xì)胞吸附于載體上。吸附法可分為物理吸附和離子吸附兩種。該法操作簡單，固定化過程對細(xì)胞活性影響小。
2，載體的材料
采用吸附法固定細(xì)胞，所用的載體主要有：硅藻土、木屑、多孔玻璃、活性炭、
多孔陶瓷、離子交換樹脂和等。塑料
3，影響吸附固定化的因素
(1)Z-電位
(2)細(xì)胞的性質(zhì)和細(xì)胞壁的組成
(3)載體的性質(zhì)
(4)pH
二、共價結(jié)合法
利用細(xì)胞表面的反應(yīng)基團(tuán)（如氨基、羧基、羥基、巰基、咪唑基）與活化的無機或有機載體反應(yīng)，形成共價鍵將細(xì)胞固定。用該法制備的固定化細(xì)胞一般為死細(xì)胞。
三、交聯(lián)法
利用雙功能或多功能試劑與細(xì)胞表面的反應(yīng)基團(tuán)（如氨基、羧基、羥基、巰基、咪唑基）反應(yīng)，從而使細(xì)胞固定。常用的交聯(lián)劑包括：戊二醛、甲苯二異氰酸酯、雙重氮聯(lián)苯胺。
由于交聯(lián)試劑的毒性，這一方法具有一定的局限性。
四、包埋法
包埋法是細(xì)胞固定化最常用的方法。包埋法可以分為：
1，微膠囊法：利用半透性聚合物薄膜將細(xì)胞包裹起來，形成微型膠囊；
2，凝膠包埋法：是在無菌條件下，將生物細(xì)胞和膠溶液混合在一起，然后再經(jīng)過相應(yīng)的造粒處理，形成直徑為1-4mm的膠粒。
常用的包埋劑為：聚丙烯酰胺、瓊脂、海藻酸、卡拉膠、二醋酸纖維、三醋酸纖維、明膠等。
五、固定化方法的比較
吸附法：條件溫和、方法簡便、載體可再生。但操作穩(wěn)定性差。
共價法：操作穩(wěn)定性高。但由于試劑的毒性，易引起細(xì)胞的破壞。
交聯(lián)法：可得到高細(xì)胞濃度，但機械強度低，無法再生，不適于實際應(yīng)用。
包埋法：細(xì)胞和載體間沒有束縛，固定化后，細(xì)胞仍保持較高活力。但這類方法只適用于小分子底物。
6.細(xì)胞活力測定的方法有哪些
根據(jù)每個細(xì)胞有一定的重量而設(shè)計的。
它可以用于單細(xì)胞、多細(xì)胞以及絲狀體微生物生長的測定。將一定體積的樣品通過離心或過濾將菌體分離出來，經(jīng)洗滌，再離心后直接稱重，求出濕重，如果是絲狀體微生物，過濾后用濾紙吸去菌絲之間的自由水，再稱重求出濕重。
不論是細(xì)菌樣品還是絲狀菌樣品，可以將它們放在已知重量的平皿或燒杯內(nèi)，于105℃烘干至恒重，取出放入干燥器內(nèi)冷卻，再稱量，求出微生物干重。如果要測定固體培養(yǎng)基上生長的放線菌或絲狀真菌，可先加熱至50℃，使瓊脂熔化，過濾得菌絲體，再用50℃的生理鹽水洗滌菌絲，然后按上述方法求出菌絲體的濕重或干重。
除了干重、濕重反映細(xì)胞物質(zhì)重量外，還可以通過測定細(xì)胞中蛋白質(zhì)或DNA的含量反映細(xì)胞物質(zhì)的量。蛋白質(zhì)是細(xì)胞的主要成分，含量也比較穩(wěn)定，其中氮是蛋白質(zhì)的重要組成元素。
從一定體積的樣品中分離出細(xì)胞，洗滌后，按凱氏定氮法測出總氮量。蛋白質(zhì)含氮量為16%，細(xì)菌中蛋白質(zhì)含量占細(xì)菌固形物的50%一80%，一般以65%為代表，有些細(xì)菌則只占13%一14%，這種變化是由菌齡和培養(yǎng)條件不同所產(chǎn)生的。
因此總含氮量與蛋白質(zhì)總量之間的關(guān)系可按下列公式計算：蛋白質(zhì)總量=含氮量*6.25核酸DNA是微生物的重要遺傳物質(zhì)，每個細(xì)菌的DNA含量相當(dāng)恒定，平均為8.4*`10^(-5)`NG。因此從一定體積的細(xì)菌懸液中所含的細(xì)菌中提取DNA，求得DNA含量，再計算出這一定體積的細(xì)菌懸液所含的細(xì)菌總數(shù)。
7.高中生物所有實驗的實驗過程,方法,結(jié)論總結(jié)
生物實驗總結(jié) 實驗一 觀察DNA和RNA在細(xì)胞中的分布 實驗原理：DNA 綠色，RNA 紅色 分布：真核生物DNA主要分布在細(xì)胞核中，線粒體和葉綠體內(nèi)也含有少量的DNA;RNA主要分布在細(xì)胞質(zhì)中。
實驗結(jié)果： 細(xì)胞核呈綠色，細(xì)胞質(zhì)呈紅色. 實驗二 物質(zhì)鑒定 還原糖 + 斐林試劑 磚紅色沉淀 脂 肪 + 蘇丹III 橘黃色 脂 肪 + 蘇丹IV 紅色 蛋白質(zhì) + 雙縮脲試劑 紫色反應(yīng) 1、還原糖的檢測 （1）材料的選取：還原糖含量高，白色或近于白色，如蘋果，梨，白蘿卜。 （2）試劑：斐林試劑（甲液：0.1g/mL的NaOH溶液，乙液：0.05g/mL的CuSO4溶液），現(xiàn)配現(xiàn)用。
（3）步驟：取樣液2mL于試管中→加入剛配的斐林試劑1mL（斐林試劑甲液和乙液等量混合均勻后再加入）→水浴加熱2min左右→觀察顏色變化（白色→淺藍(lán)色→磚紅色） ★模擬尿糖的檢測 1、取樣：正常人的尿液和糖尿病患者的尿液 2、檢測方法：斐林試劑（水浴加熱）或班氏試劑或尿糖試紙 3、結(jié)果：（用斐林試劑檢測）試管內(nèi)發(fā)生出現(xiàn)磚紅色沉淀的是糖尿病患者的尿液，未出現(xiàn)磚紅色沉淀的是正常人的尿液。 4、分析：因為糖尿病患者的尿液中含有還原糖，與斐林試劑發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀，而正常人尿液中無還原糖，所以沒有發(fā)生反應(yīng)。
2、脂肪的檢測 （1）材料的選取：含脂肪量越高的組織越好，如花生的子葉。 （2）步驟： 制作切片（切片越薄越好）將最薄的花生切片放在載玻片中央 ↓ 染色（滴蘇丹Ⅲ染液2~3滴切片上→2~3min后吸去染液→滴體積分?jǐn)?shù)50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精） ↓ 制作裝片（滴1~2滴清水于材料切片上→蓋上蓋玻片） ↓ 鏡檢鑒定（顯微鏡對光→低倍鏡觀察→高倍鏡觀察染成橘黃色的脂肪顆粒） 3、蛋白質(zhì)的檢測 （1）試劑：雙縮脲試劑（A液：0.1g/mL的NaOH溶液，B液：0.01g/mL的CuSO4溶液） （2）步驟：試管中加樣液2mL→加雙縮脲試劑A液1mL，搖勻→加雙縮尿試劑B液4滴，搖勻→觀察顏色變化（紫色） 考點提示： （1）常見還原性糖與非還原性糖有哪些？ 葡萄糖、果糖、麥芽糖都是還原性糖；淀粉、蔗糖、纖維素都是非還原性糖。
（2 ）還原性糖植物組織取材條件？ 含糖量較高、顏色為白色或近于白色，如：蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜等。 （3）研磨中為何要加石英砂？不加石英砂對實驗有何影響？ 加石英砂是為了使研磨更充分。
不加石英砂會使組織樣液中還原性糖減少，使鑒定時溶液顏色變化不明顯。 （4）斐林試劑甲、乙兩液的使用方法？混合的目的？為何要現(xiàn)混現(xiàn)用？ 混合后使用；產(chǎn)生氫氧化銅；氫氧化銅不穩(wěn)定。
（5）還原性糖中加入斐林試劑后，溶液顏色變化的順序為？ 淺藍(lán)色 棕色 磚紅色 （6）花生種子切片為何要薄？ 只有很薄的切片，才能透光，而用于顯微鏡的觀察。 （7）轉(zhuǎn)動細(xì)準(zhǔn)焦螺旋時，若花生切片的細(xì)胞總有一部分清晰，另一部分模糊，其原因一般是什么？ 切片的厚薄不均勻。
（8）脂肪鑒定中乙醇作用？ 洗去浮色。 （9）雙縮脲試劑A、B兩液是否混合后用？先加A液的目的怎樣通過對比看顏色變化？ 不能混合；先加A液的目的是使溶液呈堿性；先留出一些大豆組織樣液做對比。
實驗三 觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動 1、材料：新鮮蘚類葉、黑藻葉或菠菜葉，口腔上皮細(xì)胞臨時裝片 2、原理：葉綠體在顯微鏡下觀察，綠色，球形或橢球形。 用健那綠染液染色后的口腔上皮細(xì)胞中線粒體成藍(lán)綠色，細(xì)胞質(zhì)接近無色。
知識概要： 取材 制片 低倍觀察 高倍觀察 考點提示： （1）為什么可直接取用蘚類的小葉，而不能直接取用菠菜葉？ 因為蘚類的小葉很薄，只有一層細(xì)胞組成，而菠菜葉由很多層細(xì)胞構(gòu)成。 （2）取用菠菜葉的下表皮時，為何要稍帶些葉肉？ 表皮細(xì)胞除保衛(wèi)細(xì)胞外，一般不含葉綠體，而葉肉細(xì)胞含較多的葉綠體。
（3）怎樣加快黑藻細(xì)胞質(zhì)的流動速度？最適溫度是多少？ 進(jìn)行光照、提高水溫、切傷部分葉片；25℃左右。 （4）對黑藻什么部位的細(xì)胞觀察，所觀察到的細(xì)胞質(zhì)流動的現(xiàn)象最明顯？ 葉脈附近的細(xì)胞。
（5）若視野中某細(xì)胞中細(xì)胞質(zhì)的流動方向為順時針，則在裝片中該細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)的實際流動方向是怎樣的？ 仍為順時針。 （6）是否一般細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)不流動，只有黑藻等少數(shù)植物的細(xì)胞質(zhì)才流動？ 否，活細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)都是流動的。
（7）若觀察植物根毛細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)的流動，則對顯微鏡的視野亮度應(yīng)如何調(diào)節(jié)？ 視野應(yīng)適當(dāng)調(diào)暗一些，可用反光鏡的平面鏡來采光或縮小光圈。 （8）在強光照射下，葉綠體的向光面有何變化？葉綠體的受光面積較小有一面面向光源。
實驗四 觀察有絲分裂 1、材料：洋蔥根尖（蔥，蒜） 2、步驟：（一）洋蔥根尖的培養(yǎng) （二）裝片的制作 制作流程：解離→漂洗→染色→制片 1. 解離： 藥液： 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為15%的鹽酸，體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精（1 : 1混合液）. 時間： 3~5min .目的： 使組織中的細(xì)胞相互分離開來. 2. 漂洗： 用清水漂洗約3min. 目的： 洗去藥液，防止解離過度，并有利于染色. 3. 染色： 用質(zhì)量濃度為0.01g / mL或0.02g / mL的龍膽紫溶液（或醋酸洋紅液）染色3~ 5min 目的： 使染色體著色，利于觀察. 4. 制片： 將根尖放在載玻片上，加一滴清水，并用鑷子把根尖弄碎，蓋上蓋玻片，在蓋玻片上再加一片載玻片. 然后用拇指輕輕地按。
